急性运动中心肌线粒体动态变化对心肌炎症反应的影响

发布时间：2024-05-25 02:48

　　目的：本研究通过观察急性运动过程及其恢复期大鼠心肌线粒体功能及其融合、分裂相关蛋白的表达变化，分析心肌线粒体ROS生成与心肌炎症反应相关蛋白表达水平的关系，探讨急性运动中心肌线粒体动态变化对心肌炎症反应的影响及可能机制。 方法:雄性SD大鼠48只随机分为8组：分别是安静对照组（C）、运动45min，90min，120min（分别用E45， E90，E120表示）、运动120min后恢复12h，24h，36h，48h（分别用R12，R24，R36，R48），各组均为6只。运动组及运动恢复组大鼠置于小动物跑台进行一次急性递增负荷的运动为实验模型，在各时间点取样分析以下指标：采用荧光标记JC-1测量线粒体膜电位；采用Oxygraph-2k呼吸测量仪测量线粒体态3、态4呼吸速率，计算呼吸控制比；采用荧光素-荧光素酶发光法测线粒体ATP酶合成活性；采用荧光标记DCFH-DA测量线粒体ROS生成速率；Western blot法测定心肌组织Mfn1/2，OPA1，Drp1，Fis1，NLRP3，IL-1β的蛋白含量。 结果: 1.心肌线粒体呼吸功能及ROS的生成速率： 1）与C组相比， E45组线粒...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
2 实验材料及研究方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 动物模型
        2.2.2 技术路线
        2.2.3 心肌样本采集
        2.2.4 心肌线粒体提取
        2.2.5 蛋白样品定量
        2.2.6 心肌线粒体膜电位测定
        2.2.7 心肌线粒体 ATP 合成活力测定
        2.2.8 心肌线粒体呼吸功能测定
        2.2.9 心肌线粒体 ROS 生成速率
        2.2.10 western blotting 法检测蛋白表达
    2.3 统计学处理
3　实验结果与分析
    3.1 急性运动及恢复期大鼠心肌线粒体呼吸功能水平及 ROS 生成速率
    3.2 急性运动及恢复期大鼠心肌线粒体动力学相关蛋白表达
        3.2.1 急性运动及恢复期大鼠心肌 Mfn1 蛋白表达
        3.2.2 急性运动及恢复期大鼠心肌 Mfn2 蛋白表达
        3.2.3 急性运动及恢复期大鼠心肌 OPA1 蛋白表达
        3.2.4 急性运动及恢复期大鼠心肌 Drp1 蛋白表达
        3.2.5 急性运动及恢复期大鼠心肌 Fis1 蛋白表达
    3.3 急性运动及恢复期大鼠心肌炎性相关蛋白表达
        3.3.1 急性运动及恢复期大鼠心肌 NLRP3 蛋白表达
        3.3.2 急性运动及恢复期大鼠心肌 IL-1β蛋白表达
    3.4 大鼠心肌线粒体 ROS 生成，融合分裂蛋白及炎症相关因子蛋白表达的相关性分析
4　讨论
    4.1 急性运动对线粒体呼吸功能和 ROS 生成的影响
    4.2 急性运动对线粒体动力学的影响
    4.3 急性运动心肌对炎症反应的影响
    4.4 线粒体动力学、ROS、炎症反应的关系
5 研究结论
6 本研究的不足及今后研究的考虑
参考文献
论文综述
    参考文献
附录
致谢
研究生个人简介



本文编号：3981594