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有氧运动影响压力负荷致早期心衰的大鼠心脏功能的分子基础

发布时间:2017-07-31 23:12

  本文关键词:有氧运动影响压力负荷致早期心衰的大鼠心脏功能的分子基础


  更多相关文章: 心衰 有氧运动 线粒体 生物合成 融合分裂 自噬


【摘要】:目的:本实验室的相关研究发现,有氧运动可以有效延缓压力负荷大鼠心衰进程,改善心衰症状,这种改善是基于有氧运动对心肌线粒体功能的调节的,尤其是对线粒体呼吸链复合体I的活力的调节。本研究的目的是探讨有氧运动对压力负荷致早期心衰大鼠心脏功能的调节与线粒体生物合成和质量控制的关系,试图从这个角度探讨有氧运动干预的分子机理。方法:以雄性Wistar大鼠为材料,以腹主动脉缩窄手术造压力后负荷模型,并饲养8周至早期心衰的发生。假手术组(Sham)无心衰表征。将早期心衰大鼠随机分为手术安静组(Rest)和手术运动组(Exer),与假手术组一起继续饲养8周,Sham组和Rest组大鼠均自由活动,Exer组进行有氧运动训练,方式为跑台跑步,运动强度20米/分钟,每天1小时,每周训练5天。有氧运动训练结束后,取各组大鼠心脏左心室,以Southern Blot法测定心肌细胞中线粒体DNA的拷贝数,以Western Blot检测线粒体生物合成及质量控制相关蛋白的表达。结果:1.与Sham组相比,Rest组大鼠mt DNA拷贝数显著增加,Exer组大鼠的mt DNA拷贝数则与Sham组无差异;2.在心衰大鼠(Rest组)中,与mt DNA拷贝数增加相一致,线粒体编码蛋白ND1及ATP6表达量增加,而核编码的呼吸链组分蛋白COXⅣ和ATP5A表达反而有所下降,SDHB表达增加,转录因子TFAM及调节因子PGC1α表达显著下降;与Rest组相比,Exer组大鼠的线粒体DNA拷贝数减少,同时ND1表达减少,ATP6的表达反而增加。核编码的COXⅣ、ATP5A、SDHB及TFAM的表达均没有显著性变化。Exer组PGC1α的表达较Rest组增加并趋向Sham组水平。3.与Sham组相比,Rest组大鼠的融合蛋白Mfn1、Mfn2、OPA1及分裂蛋白Drp1、Fis1的表达均下降;与Rest组相比,Exer组大鼠的这些融合分裂蛋白均无显著性变化。4.与Sham组相比,早期心衰大鼠的自噬相关蛋白LC-3、Fundc1、Atg5的表达均下降,LC-3B/LC-3A的值也下降。有氧运动训练使早期心衰大鼠的LC-3、Fundc1的表达增加,LC-3B/LC-3A的值也增加,但是Atg5的表达无差异。结论:(1)早期心衰大鼠的线粒体DNA及其编码蛋白增加,但核编码的线粒体蛋白却是减少的(SDHB除外),说明线粒体编码蛋白和核编码蛋白具有不一致性,因此总线粒体数量并不增加;持续有氧运动并不能调节压力负荷致早期心衰大鼠的心肌线粒体总量,只是对特定蛋白的生物合成进行调节,从而达到缓解心衰进程的作用;(2)持续有氧运动对压力负荷致早期心衰大鼠的干预作用并不是通过调节心肌线粒体的融合分裂而实现的;(3)持续有氧运动通过有效地改善LC-3和Fundc1蛋白的表达以及增加LC-3B的比例提高了早期心衰大鼠线粒体的自噬能力,从而起到清除受损线粒体的作用。(4)在有氧运动对早期心衰的干预过程中,由PGC1α对线粒体生物合成和自噬的调控起到很大作用。
【关键词】:心衰 有氧运动 线粒体 生物合成 融合分裂 自噬
【学位授予单位】:天津体育学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:G804.2
【目录】:
  • 摘要6-8
  • ABSTRACT8-11
  • 1.前言11-13
  • 2.材料与方法13-17
  • 2.1 材料来源13
  • 2.2 试剂13-17
  • 2.2.1 普通试剂来源13-16
  • 2.2.2 使用仪器16
  • 2.2.3 特殊试剂配制16-17
  • 3.实验方法17-21
  • 3.1 实验分组17
  • 3.2 mtDNA拷贝数的检测17-18
  • 3.3 蛋白表达的测定18-21
  • 3.3.1 蛋白制备18
  • 3.3.2 Bradford法测定蛋白浓度18-19
  • 3.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳19-20
  • 3.3.4 电转印20-21
  • 3.3.5 Western杂交21
  • 3.3.6 蛋白相对定量分析21
  • 4.实验结果21-34
  • 4.1 运动训练对早期心衰大鼠线粒体生物合成的影响21-27
  • 4.1.1 运动训练对早期心衰大鼠mtDNA拷贝数的影响21-22
  • 4.1.2 运动训练对早期心衰大鼠线粒体定位蛋白的影响22-27
  • 4.2 运动训练对早期心衰大鼠线粒体质量控制的影响27-34
  • 4.2.1 运动训练对早期心衰大鼠线粒体融合分裂的影响27-31
  • 4.2.2 运动训练对早期心衰大鼠线粒体自噬的影响31-34
  • 5.讨论34-38
  • 5.1 有氧运动对压力负荷心衰的心肌线粒体的的结构和功能的影响34
  • 5.2 有氧运动对压力负荷心衰中心肌线粒体生物合成的影响34-36
  • 5.3 有氧运动对早期心衰心肌线粒体融合分裂的影响36
  • 5.4 有氧运动对早期心衰的心肌线粒体自噬的影响36-38
  • 5.5 小结38
  • 6.结论38-39
  • 参考文献39-42
  • 综述 运动与心衰中心肌线粒体的生物合成,融合分裂以及自噬的关系42-59
  • 参考文献54-59
  • 致谢59-60
  • 研究生个人简历60

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本文编号:601522

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