烟碱降解细菌的筛选及应用研究

发布时间：2024-05-09 06:13

　　烟碱即尼古丁,在烟草生物碱中占据很大比例。我国烟草种植面积及产量均在世界前列,在烟草加工过程中会产生大量的废水,废水中存在的烟碱由于其不易降解的特性,严重危害人们的生存环境。国内外很多学者通过长期的试验研究,陆续发现一些降解烟碱的微生物,利用微生物及其产物降解烟碱具有很高的应用价值,其在降解烟碱含量带来的有益影响让更多的研究者投身其中。本研究以烟草厂污染的土壤为试验材料,经过初筛、复筛得到了21株降解烟碱的菌株,筛选出降解效果最优菌株对其进行鉴定并确定其最佳的生长条件,探索其在烟草加工废水处理的应用。主要结论如下:(1)在以烟碱为唯一碳氮源的富集培养基上对菌株进行初筛,通过紫外分光光度法,确定菌株降解能力,实现对菌株的复筛,得到高效降解菌株,编号为E3。(2)对菌株E3进行形态学、生理生化试验,并通过分子学试验提取DNA片段,经过PCR扩增,凝胶电泳试验,DNA测序等试验获取菌株序列。通过Blast对比,明确其在细菌分类中的地位,构建系统发育树,确定菌株为中间苍白杆菌(Ochrobactrum intermedium),命名为中间苍白杆菌E3(O.intermedium E3)。(3)...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1烟碱紫外吸收标准曲线

图2.1烟碱紫外吸收标准曲线Fig.2.1TheUVabsorptioncurveofnicotine碱降解菌株的复筛初筛得到的21株菌株接种到已知烟碱含量的烟碱培养液中进一荡培养，振荡器的摇动速度为200r/min，温度设定为30℃，培酵液中烟碱的浓度....

图3.1菌株在LB烟碱培养基生长情况

图3.1菌株在LB烟碱培养基生长情况Fig3.1GrowthofstraininLBnicotinemedium形态学观察，发现菌株E3在LB培养基平板上生长1-2mm，白色，边缘整齐，光滑，半透明，凸起。图3.2菌株E3革兰氏染色结果F....

图3.2菌株E3革兰氏染色结果

态学和生理生化特征图3.1菌株在LB烟碱培养基生长情况Fig3.1GrowthofstraininLBnicotinemedium形态学观察，发现菌株E3在LB培养基平板上1-2mm，白色，边缘整齐，光滑，半透明，凸

图3.4菌株E316SrDNA核苷酸序列

图3.3菌株E3的16SrDNA序列PCR扩增电泳图。1：DL2000Marker；2、3均为PCR产物Figure3.316SrDNAsequenceofstrainE3amplifiedbyPCRandelectropHores....

本文编号：3968431