农杆菌介导的苜蓿耐盐SOS多基因遗传转化研究

发布时间：2024-05-16 22:30

　　苜蓿(Medicago sativa L.)是全世界分布最广的一种多年生豆科牧草,也是我国畜牧业生产中的重要饲草饲料,具有产量高,营养价值丰富,氨基酸组成均衡,畜禽均喜食等特性。随着生态文明建设和现代草畜产业发展,迫切需求节水抗旱和耐盐苜蓿新品种。利用分子育种手段是加快培育苜蓿耐盐新品种的有效途径。SOS(Salt Overly Sensitive,SOS)家族基因具有调控离子平衡作用,已在拟南芥、水稻、烟草和草坪草等植物中验证具有提高耐盐性功能,但目前应用该家族基因进行苜蓿耐盐性改良报道较少。本研究基于苜蓿高频再生体系的建立,优化了农杆菌介导的SOS家族多基因(SOS2和SOS3)遗传转化体系,获得了耐盐转基因株系,并在室内和田间进行了耐盐性鉴定和评价。主要结果如下:1.通过愈伤组织和子叶节离体培养,构建了高频的愈伤组织再生体系和子叶节再生体系。以“杰克林”、“阿尔冈金”、“金皇后1”、“金皇后2”、“皇后2000”、“柏拉图”、“三得利”、“甘农3号”、“敖汉”和“陇东”10个苜蓿品种为研究对象,对其愈伤组织诱导分化,不定芽诱导伸长和生根等影响因素进行了系统研究,研究表明“杰克林”...

【文章页数】：143 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－１子叶节外植体的切取方式??

２．１．２．７．１子叶节外植体的获得及芽启动??７?ｄ苗龄的“金皇后２”苜蓿子叶节外植体通过两种切取方式：①去除顶芽，保留一片子叶和２??ｍｍ下胚轴；②去除顶芽，保留两片子叶的２／３和２?ｍｍ下胚轴（图２－１）。将获得的子叶节竖直向下??插入ＭＳ或１／２?ＭＳ培养基中，光照或暗培....

图２－２不同培养基培养出的无菌苗??

将己消毒的肾型苜蓿种子摆放在种子萌发培养基上，接种时应将种子按照形态学种脐朝下的??方式，种子在发芽时胚根可以受地心引力迅速向培养基中深入生长，并且可以缩短种子的萌发时??间（图２－２）。??基因型是直接影响再生体系及遗传转化能否成功的关键因素之一。１０个不同苜蓿品种的基因??型....

图２－４种子发芽情况??“”“”“”

?Ｗ?？ｓｓ＇＊??图２－３不同苜蓿品种的种子萌发率??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?ｓｅｅｄ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ａｌｆａｌｆａ?ｖａｒｉｅｔｉｅｓ??图２－４种子发芽情况??ａ?“杰克林”种子发芽；ｂ?“金皇后２”种子发芽；ｃ?“三得利”种....

图２－３不同苜蓿品种的种子萌发率??

图２－３不同苜蓿品种的种子萌发率??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?ｓｅｅｄ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ａｌｆａｌｆａ?ｖａｒｉｅｔｉｅｓ??图２－４种子发芽情况??ａ?“杰克林”种子发芽；ｂ?“金皇后２”种子发芽；ｃ?“三得利”种子发芽；ｄ光照情况下....

本文编号：3975002