铁蛋白对根癌农杆菌的铁响应、胞内铁平衡、抗氧化性和致瘤性的影响的研究
发布时间：2021-07-26 07:51
根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）是一种栖生于土壤中的革兰氏阴性植物病原菌,在自然条件下该菌能够引起双子叶植物的冠瘿瘤疾病。根癌农杆菌在侵染宿主的过程中可将自身Ti质粒上的T-DNA转移并整合到宿主细胞基因组中,使宿主发生遗传转化。基于这一特性,根癌农杆菌被广泛用于绝大部分双子叶植物以及部分单子叶植物的植物转基因工程中。目前,对根癌农杆菌的转化机制的研究已经较为清楚,但仍有许多未知因素影响着该菌的致瘤能力和转基因效率。其中根癌农杆菌的铁代谢平衡和抗氧化胁迫能力与其致瘤能力息息相关。铁蛋白在维持细菌细胞铁代谢平衡和应对氧化胁迫方面发挥重要作用。细菌中一般存在三种类型的铁蛋白:Ftn、Bfr和Dps,然而根癌农杆菌C58中有且仅有一种Bfr和一种Dps。与其他细菌相比,根癌农杆菌的Dps在N端缺少11个氨基酸,体外实验证明根癌农杆菌的Dps无法结合DNA但仍能发挥铁解毒的功能;根癌农杆菌的Bfr在N端多了8个氨基酸,其具体功能还未知。基于根癌农杆菌铁蛋白的独特性以及铁代谢对根癌农杆菌致病性的影响,对根癌农杆菌铁蛋白的研究具有非常重要的意义以及潜在的应用价值。本...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]血红素对大肠杆菌铁蛋白稳定性及自组装的影响[J]. 张瑜,周金花,周亦琛,李迅,王飞. 生命科学研究. 2017(04)
[2]动物储铁蛋白研究进展[J]. 王静慈,施海峰. 生命科学. 2012(08)
[3]铁蛋白铁释放机理的研究进展[J]. 白宇飞,张拓,李美良,赵广华. 食品工业科技. 2012(01)
[4]Induction of chromosomal inversion by integration of T-DNA in the rice genome[J]. Chuanfeng Zhu,Jiahe Wu,Chaozu He State Key Laboratory of Plant Genomics,Institute of Microbiology,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China. 遗传学报. 2010(03)
[5]耐辐射奇球菌dps突变株的构建和蛋白功能初步研究[J]. 严卓彦,许镇坚,许光治,田兵,华跃进. 微生物学报. 2007(04)
[6]根癌农杆菌介导酿酒酵母的遗传转化[J]. 张君胜,饶志明,吴蕾,沈微,唐雪明,方慧英,诸葛健. 食品与生物技术学报. 2006(03)
[7]棕色固氮菌细菌铁蛋白释放铁的动力学方程和性质[J]. 张凤章,黄河清,林庆梅,曾润颖,邱雪慧,黄南昌,许良树,曾定. 生物物理学报. 1998(01)
[8]细菌铁蛋白释放铁的动力学研究[J]. 黄河清,张凤章,陈灿和,邱雪慧,许良树,曾定. 生物物理学报. 1996(01)
本文编号：3303155
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１重叠延伸ＰＣＲ结果??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?（ＤＬ?２０００）?；?（Ａ）?１：?ＰＣＲ扩增妒基因启动子＋妒厕１上游序列（６８９?ｂｐ）?；?２：??ＰＣＲ扩增阶〃＾下游序列（３４０?ｂｐ）?；?（Ｂ）?１和２：?ＰＣＲ扩增阶基因启动子（Ｃ）?１和２：?ＰＣＲ??
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第３章实验结果与分析??Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９??ＩＱＯｋＰａ??７０?ｋＤａ?ＨＢＰ??４０?ｋＢａ?ｌｊ｜．＇．：??３０?ｋＤａ?＇ｔｔＫ－?’：??２５ｋＤａ?ｆＰ?翻麵棚細＾奪??１４?ｋＤａ?｜??图３－４各重组蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析??Ｍ：?ｐｒｏｔｅｉｎｍａｒｋｅｒ；?１、４、７：纯化后的?Ｂｆｒ－Ｈｉｓ；?２、５、８：纯化后的?ＢｆｒＭ６０Ｌ－Ｈｉｓ；?３、６、９：纯化??后的?Ｄｐｓ－Ｈｉｓ。??Ｆｉｇ．?３－４?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ??Ｍ：?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｍａｒｋｅｒ；?１，４，?７：?Ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｂｆｒ－Ｈｉｓ；?２，?５，?８：?Ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ＢｆｒＭ６０Ｌ－Ｈｉｓ；?３，?６，?９：?Ｐｕｒｉｆｉｅｄ??ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｄｐｓ－Ｈｉｓ．??在细菌体内一个Ｂｆｉ？由相同的２４个亚基自组装形成２４聚体（约４８０?ｋＤａ），一个??Ｄｐｓ由相同的１２个亚基自组装形成１２聚体（约２２０?ｋＤａ）。为确定Ｈｉｓ－ｔａｇ是否会影响??根癌农杆菌铁蛋白在体外的自组装，我们利用Ｎａｔｉｖｅ－ＰＡＧＥ鉴定纯化过后的各重组蛋??白在体外的自组装形式，结果如图３－５所示。我们发现，在体外条件下，Ｄｐｓ能够较为??稳定的自组装形成１２聚体（图３－５?Ａ）；而Ｂｆｒ—部分能自组装形成２４聚体，另一部??分形成低聚体（绝大多数以２聚体形式存在）（图３－５?Ｂ），这与其他细菌Ｂｆｒ在体外自??组装形式基本相同（张瑜等，２０１７）。说明Ｈｉｓ－ｔａｇ的存在不影响根癌农杆菌铁蛋白在体??外的
【参考文献】：
期刊论文
[1]血红素对大肠杆菌铁蛋白稳定性及自组装的影响[J]. 张瑜,周金花,周亦琛,李迅,王飞. 生命科学研究. 2017(04)
[2]动物储铁蛋白研究进展[J]. 王静慈,施海峰. 生命科学. 2012(08)
[3]铁蛋白铁释放机理的研究进展[J]. 白宇飞,张拓,李美良,赵广华. 食品工业科技. 2012(01)
[4]Induction of chromosomal inversion by integration of T-DNA in the rice genome[J]. Chuanfeng Zhu,Jiahe Wu,Chaozu He State Key Laboratory of Plant Genomics,Institute of Microbiology,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China. 遗传学报. 2010(03)
[5]耐辐射奇球菌dps突变株的构建和蛋白功能初步研究[J]. 严卓彦,许镇坚,许光治,田兵,华跃进. 微生物学报. 2007(04)
[6]根癌农杆菌介导酿酒酵母的遗传转化[J]. 张君胜,饶志明,吴蕾,沈微,唐雪明,方慧英,诸葛健. 食品与生物技术学报. 2006(03)
[7]棕色固氮菌细菌铁蛋白释放铁的动力学方程和性质[J]. 张凤章,黄河清,林庆梅,曾润颖,邱雪慧,黄南昌,许良树,曾定. 生物物理学报. 1998(01)
[8]细菌铁蛋白释放铁的动力学研究[J]. 黄河清,张凤章,陈灿和,邱雪慧,许良树,曾定. 生物物理学报. 1996(01)
本文编号：3303155
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