胰岛素信号对大草蛉生殖调控的分子模式
发布时间：2023-05-07 16:40
大草蛉(Chrysopapallens)作为重要的捕食性天敌昆虫,在农林害虫生物防治中具有非常广阔的应用前景。营养丰富且价廉的饲料与高效的饲养体系是实现大草蛉商业化生产的前提。目前大草蛉饲养过程中,当饲料营养不平衡时,或通过冷藏延长产品货架期时,常会碰到产卵量减少,卵孵化率下降等问题,严重制约生产与应用。研究大草蛉生殖遗传特性,有利于发展调控大草蛉产卵的技术与方法,提高饲养效率,促进商业化生产。胰岛素样肽和信号通路在昆虫生殖、代谢等生理过程中发挥非常重要的功能。本文围绕胰岛素样肽和信号通路调控大草蛉生殖的分子模式进行研究。所获得的主要研究结果如下:1.牛胰岛素对大草蛉产卵的促进作用注射牛胰岛素可提高雌虫卵黄原蛋白的表达量。首先证明了将牛胰岛素注射到雌性大草蛉卵黄发生前,可以加速卵巢的成熟,增加卵黄原蛋白(Vg)的表达,提高生殖能力和增强蛋白酶活性。2.牛胰岛素对冷藏后大草蛉产卵的恢复作用通过低温贮藏不同天数的大草蛉的蛹,冷藏天数越多,其生殖能力越低。解剖低温贮藏羽化第5天的大草蛉雌虫进行卵巢观察,未冷藏的卵巢发育已经成熟,冷藏后的卵巢发育不均匀,极端的卵巢发育成最初未成熟的状态。冷藏后...
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 大草蛉在害虫生物防治中的研究进展
1.1.1 大草蛉的生物学
1.1.2 大草蛉人工饲养与释放技术进展
1.1.3 大草蛉规模化生产存在的问题
1.2 胰岛素信号通路在昆虫中的研究
1.2.1 胰岛素信号通路对昆虫的激素调控
1.2.2 胰岛素信号通路对昆虫的生殖研究
1.3 昆虫胰岛素样肽(ILPs)的研究进展
1.4 有关昆虫卵子发生的研究
1.5 ILPs及其信号通路对昆虫卵子发生的调控功能
1.6 本研究的目的和意义
2 牛胰岛素促进大草蛉卵巢发育和产卵作用
2.1 材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 主要试剂和药品
2.1.3 主要仪器
2.1.4 主要溶液的配制
2.1.5 显微注射
2.1.6 检测Vg基因的表达量
2.1.7 观察卵巢发育形态
2.1.8 ELISA法测定大草蛉卵黄原蛋白的表达量
2.1.9 大草蛉蛋白酶活性测定
2.2 结果与分析
2.2.1 牛胰岛素促进大草蛉的生殖
2.2.2 大草蛉卵巢的发育情况
2.2.3 牛胰岛素注射后雌虫中Vg的表达量
2.2.4 注射牛胰岛素的大草蛉蛋白酶活性检测
2.3 本章小结
3 牛胰岛素对冷藏大草蛉生殖力恢复的作用
3.1 材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 主要试剂和药品
3.1.3 主要仪器
3.1.4 主要溶液的配制
3.1.5 大草蛉体内ILPs表达量检测
3.1.6 大草蛉成虫酶活性的检测
3.1.7 大草蛉生殖指标的统计
3.1.8 观察卵巢发育形态
3.2 结果与分析
3.2.1 冷藏对大草蛉羽化率、生殖力和寿命的影响
3.2.2 冷藏对大草蛉卵巢发育的影响
3.2.3 冷藏对大草蛉消化酶的影响
3.2.4 牛胰岛素对大草蛉卵巢发育的影响
3.2.5 牛胰岛素对大草蛉生殖力的恢复
3.2.6 冷藏对ILPs表达量的影响
3.3 本章小结
4 四个胰岛素样肽调控大草蛉生殖功能
4.1 材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 dsRNA的制备
4.1.3 dsRNA注射
4.1.4 基因沉默效率的检测
4.1.5 检测干扰基因的生物学指标
4.1.6 卵巢的发育情况
4.1.7 数据分析统计
4.2 结果与分析
4.2.1 干扰片段RT-PCR扩增
4.2.2 dsRNA合成电泳结果
4.2.3 基因沉默效率的分析
4.2.4 dsCpILP1对大草蛉生殖调控的结果分析
4.2.5 dsCpILP2对大草蛉生殖调控的结果分析
4.2.6 dsCpILP3对大草蛉生殖调控的结果分析
4.2.7 dsCpILP4对大草蛉生殖调控的结果分析
4.3 本章小结
5 两个胰岛素受体对大草蛉在卵巢管中的生殖调控功能
5.1 材料与方法
5.1.1 实验材料
5.1.2 dsRNA的制备
5.1.3 RNA干扰注射
5.1.4 基因沉默效率的检测
5.1.5 检测干扰基因的生物学指标
5.1.6 数据分析统计
5.2 结果与分析
5.2.1 dsRNA的合成
5.2.2 靶标基因干扰效率的分析
5.2.3 dsCpInR1受体干扰后结果分析
5.2.4 dsCpInR2受体干扰后结果分析
5.3 本章小结
6 胰岛素受体下游信号通路与信使的功能研究
6.1 材料与方法
6.1.1 实验材料
6.1.2 dsRNA的制备
6.1.3 RNA干扰注射
6.1.4 基因沉默效率的检测
6.1.5 检测干扰基因的生物学指标
6.1.6 卵巢的发育情况
6.1.7 大草蛉总蛋白提取技术
6.1.8 数据分析统计
6.2 结果与分析
6.2.1 dsRNA的合成
6.2.2 目的基因干扰效率的分析
6.2.3 dsCperk干扰后表型结果与分析
6.2.4 dsCpFoxO干扰后表型结果与分析
6.2.5 dsCpAkt干扰后表型结果与分析
6.2.6 卵黄原蛋白的Western blot鉴定
6.3 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3810938
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 大草蛉在害虫生物防治中的研究进展
1.1.1 大草蛉的生物学
1.1.2 大草蛉人工饲养与释放技术进展
1.1.3 大草蛉规模化生产存在的问题
1.2 胰岛素信号通路在昆虫中的研究
1.2.1 胰岛素信号通路对昆虫的激素调控
1.2.2 胰岛素信号通路对昆虫的生殖研究
1.3 昆虫胰岛素样肽(ILPs)的研究进展
1.4 有关昆虫卵子发生的研究
1.5 ILPs及其信号通路对昆虫卵子发生的调控功能
1.6 本研究的目的和意义
2 牛胰岛素促进大草蛉卵巢发育和产卵作用
2.1 材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 主要试剂和药品
2.1.3 主要仪器
2.1.4 主要溶液的配制
2.1.5 显微注射
2.1.6 检测Vg基因的表达量
2.1.7 观察卵巢发育形态
2.1.8 ELISA法测定大草蛉卵黄原蛋白的表达量
2.1.9 大草蛉蛋白酶活性测定
2.2 结果与分析
2.2.1 牛胰岛素促进大草蛉的生殖
2.2.2 大草蛉卵巢的发育情况
2.2.3 牛胰岛素注射后雌虫中Vg的表达量
2.2.4 注射牛胰岛素的大草蛉蛋白酶活性检测
2.3 本章小结
3 牛胰岛素对冷藏大草蛉生殖力恢复的作用
3.1 材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 主要试剂和药品
3.1.3 主要仪器
3.1.4 主要溶液的配制
3.1.5 大草蛉体内ILPs表达量检测
3.1.6 大草蛉成虫酶活性的检测
3.1.7 大草蛉生殖指标的统计
3.1.8 观察卵巢发育形态
3.2 结果与分析
3.2.1 冷藏对大草蛉羽化率、生殖力和寿命的影响
3.2.2 冷藏对大草蛉卵巢发育的影响
3.2.3 冷藏对大草蛉消化酶的影响
3.2.4 牛胰岛素对大草蛉卵巢发育的影响
3.2.5 牛胰岛素对大草蛉生殖力的恢复
3.2.6 冷藏对ILPs表达量的影响
3.3 本章小结
4 四个胰岛素样肽调控大草蛉生殖功能
4.1 材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 dsRNA的制备
4.1.3 dsRNA注射
4.1.4 基因沉默效率的检测
4.1.5 检测干扰基因的生物学指标
4.1.6 卵巢的发育情况
4.1.7 数据分析统计
4.2 结果与分析
4.2.1 干扰片段RT-PCR扩增
4.2.2 dsRNA合成电泳结果
4.2.3 基因沉默效率的分析
4.2.4 dsCpILP1对大草蛉生殖调控的结果分析
4.2.5 dsCpILP2对大草蛉生殖调控的结果分析
4.2.6 dsCpILP3对大草蛉生殖调控的结果分析
4.2.7 dsCpILP4对大草蛉生殖调控的结果分析
4.3 本章小结
5 两个胰岛素受体对大草蛉在卵巢管中的生殖调控功能
5.1 材料与方法
5.1.1 实验材料
5.1.2 dsRNA的制备
5.1.3 RNA干扰注射
5.1.4 基因沉默效率的检测
5.1.5 检测干扰基因的生物学指标
5.1.6 数据分析统计
5.2 结果与分析
5.2.1 dsRNA的合成
5.2.2 靶标基因干扰效率的分析
5.2.3 dsCpInR1受体干扰后结果分析
5.2.4 dsCpInR2受体干扰后结果分析
5.3 本章小结
6 胰岛素受体下游信号通路与信使的功能研究
6.1 材料与方法
6.1.1 实验材料
6.1.2 dsRNA的制备
6.1.3 RNA干扰注射
6.1.4 基因沉默效率的检测
6.1.5 检测干扰基因的生物学指标
6.1.6 卵巢的发育情况
6.1.7 大草蛉总蛋白提取技术
6.1.8 数据分析统计
6.2 结果与分析
6.2.1 dsRNA的合成
6.2.2 目的基因干扰效率的分析
6.2.3 dsCperk干扰后表型结果与分析
6.2.4 dsCpFoxO干扰后表型结果与分析
6.2.5 dsCpAkt干扰后表型结果与分析
6.2.6 卵黄原蛋白的Western blot鉴定
6.3 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3810938
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/3810938.html
