CMV复制相关寄主因子的蛋白组学研究

发布时间：2024-05-09 06:17

　　黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是经济危害最为严重的植物病毒之一。CMV属于雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)、黄瓜花叶病毒属(Cucumovirus)的典型成员,其基因组由3条正义、单链的RNA组成。该病毒由其基因组RNA1和RNA2编码的复制酶组分1a和RdRp蛋白通过招募寄主因子,在液泡膜上形成复制复合体(VRC,viral replication complex)进行病毒的复制。研究至今,有关参与调控CMV复制的寄主因子的研究相当有限。因此,鉴定和分析参与CMV复制的寄主因子对于解析CMV复制的分子机理具有一定的研究意义。基于CMV在液泡膜上复制的特性,本论文首先通过制备健康和CMV侵染的烟草原生质体,进而通过分离原生质体中的液泡,成功获得相当量的液泡样品。然后,通过超速离心富集液泡膜,利用LC/MS-MS技术对液泡膜蛋白进行质谱鉴定。结果显示:在Mock样品中检测到2种CMV样品中未检测到的寄主蛋白,而在CMV侵染的样品中则检测到35种病毒特异的寄主蛋白。蛋白种类的增加很可能与病毒在液泡膜上复制有关。我们通过蛋白种类的比较和多肽数目的...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1正链RNA病毒的复制循环

图1.1正链RNA病毒的复制循环Schematicinfectioncycleofpositive-senseR寄主蛋白因子能选择性地结合病毒RNA，从而影响胞过程中需要精确的调节宿主生化途径复制需要募集病毒基因组RNA，病毒和1.1)。参与病毒复制的寄主....

图1.2CMV基因组结构

的构成及其功能为29nm的二十面体颗粒结构，由180个亚单位RNA组成，其基因组包含3条正义单链RNAN端具有甲基转移酶结构域和C端具有解旋酶结亚基因组RNA4A编码2b蛋白。2a蛋白为依赖ndentRNApolymerase,RdR....

图2.2Western检测病毒CP蛋白

图2.2Western检测病毒CP蛋白FIG2.2DetectingofvirusCPproteinsbyWesternb分离的结果，我们首先从Mock和CMV侵染的（图2.3）。然后，通过超速离心对原生质体速分离后的液泡分层情况如图2.4....

图2.5显微镜观察分离的液泡FIG2.5ObservationofvacuoleunderMicroscope

图图2.5显微镜观察分离的液泡FIG2.5ObservationofvacuoleunderMicroscope们利用烟草作为测试植物，通过农杆菌注射的方法进MV强毒株的侵染很可能会影响液泡的正常发育，因S-CMV侵染烟草。LS-CMV侵染烟草并没有引起明显的....

本文编号：3968435