大弹涂鱼适应盐度胁迫的糖代谢模式及葡萄糖和二甲双胍的调控作用研究

发布时间：2020-04-12 13:27

【摘要】：本研究探讨了不同盐度胁迫对大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)糖代谢相关酶活性及基因表达量的影响,并分析了外源葡萄糖和二甲双胍对高盐胁迫下大弹涂鱼糖代谢的调节作用。研究成果可为鱼类人工全价配合饲料的开发提供必要的参考依据。(1)急性盐度胁迫对大弹涂鱼糖代谢的影响。实验共设置3个盐度处理组:低盐度组(0‰)、正常盐度组(17‰,对照组)、高盐度组(30‰),胁迫实验为期5d。结果发现,低盐度组实验鱼肝糖原含量显著降低;低盐度组实验鱼葡萄糖激酶(GK)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)活性最高,其次是高盐组,对照组实验鱼活性最低;高、低盐度组实验鱼磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)酶活性显著高于对照组;高盐组实验鱼FBPase基因m RNA表达量显著高于低盐度组,对照组实验鱼果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)基因表达量最低;低盐度组实验鱼PFK基因m RNA表达量显著高于对照组,而高盐度组实验鱼PFK基因表达量最低。结果表明,盐度胁迫加速了大弹涂鱼肝糖原的分解,大弹涂鱼通过提高糖代谢活动为机体提供能量。(2)急性盐度胁迫下大弹涂鱼肝和鳃组织糖代谢的差异。实验共设置2个盐度处理组:正常盐度组(17‰,对照组)和高盐度组(30‰),胁迫实验为期24 h。结果发现,高盐度组实验鱼肝糖原和鳃糖原含量分别在24 h和3 h时达到最低水平,均显著低于对照组;高盐度组实验鱼鳃中钠钾ATP酶(Na+/K+-ATPase)酶活力呈先升高后降低趋势,在6h显著高于对照组;高盐度组实验鱼肝PK和GP酶活力呈先升高后降低趋势,均于3 h时达到最高,显著高于对照组;高盐度组实验鱼鳃PK和GP酶活力呈先升高后降低趋势,分别于1 h和6 h时达到最高,显著高于对照组;高盐度组实验鱼肝GS和GP基因m RNA表达量呈先升高后降低趋势,分别于3 h和1 h时达到最高,显著高于对照组;高盐度组实验鱼鳃GS、GP和NKA基因m RNA表达量呈先升高后降低趋势,分别于3 h,1 h和12 h时达到最高,显著高于对照组。结果表明,急性盐度胁迫下大弹涂鱼鳃组织能够通过分解糖原为机体提供能量。(3)葡萄糖对急性盐度胁迫下大弹涂鱼糖代谢的影响。实验共设置2个盐度处理组:正常盐度组(17‰,对照组)和高盐度组(30‰),腹腔注射葡萄糖剂量为30 mg/100g,胁迫实验为期12 h。结果发现,对照组实验鱼肝糖原含量呈先升高后降低趋势,于1 h时达到最高,而高盐度组实验鱼肝糖原在整个实验期间无显著性差异;对照组实验鱼GK、PK酶活性呈先升高后降低趋势,分别于3 h和1 h时达到最高;高盐度组实验鱼GK、PK和PFK酶活性呈先升高后降低趋势,均于1 h时达到最高;对照组实验鱼PEPCK酶活性呈逐渐降低趋势,高盐度组实验鱼PEPCK和FBPase酶活性呈先升高后降低再升高趋势;高盐度组实验鱼PFK基因m RNA表达量最低值出现在6 h;高盐度组和对照组实验鱼PFK和FBPase基因m RNA表达量最低值出现在3 h。结果表明,外源补充葡萄糖能够提高高盐胁迫下大弹涂鱼肝脏糖酵解的作用,而减弱糖异生的作用。(4)二甲双胍对急性盐度胁迫下大弹涂鱼糖代谢的影响。实验共设置2个处理组:高盐度组(30‰)和二甲双胍组(30‰,10μM),胁迫实验为期24 h。结果表明,高盐度组和二甲双胍组实验鱼肝GK的m RNA表达量呈先升高后降低趋势,6-24 h时,二甲双胍组实验鱼显著高于高盐度组;高盐度组和二甲双胍组实验鱼G6Pase的m RNA表达量呈先升高后降低趋势,6-24 h时,二甲双胍组显著低于高盐度组;高盐度组和二甲双胍组实验鱼PEPCK的m RNA表达量呈逐渐上升趋势,二甲双胍组显著低于高盐度组。结果表明,二甲双胍可以提高高盐胁迫下大弹涂鱼肝脏中糖酵解的作用,降低糖异生的作用,可以有效的促进大弹涂鱼对碳水化合物的利用。
【图文】：

mRNA表达量

图 3-1 Na+/K+-ATP 酶 mRNA 表达量Fig.3.1 The mRNA expression of Na+/K+-ATPase enzyme肝和鳃中 GS 的 mRNA 表达量随时间变化无显著性差异高盐组鳃中 GS 的 mRNA 表达量随时间变化逐渐降低，，<0.05；图 3-2)，高盐组肝中 GS 的 mRNA 表达量随时间到最高水平。对照组肝和鳃中 GP 的 mRNA 表达量随时5；图 3-3；图 3-5)。高盐海组鱼鳃中 GP 的 mRNA 表达再升高，在 1h 时高盐组 GP 的 mRNA 表达量显著高于组中鱼肝中 GP 的 mRNA 表达量随时间变化先升高后降显著高于对照组(P<0.05；图 3-5)。

对照组,最高水平,鱼肝,鱼鳃

鳃中 GS 的 mRNA 表达量随时间变化无显著性差异(P＞0.05；图3-2；图 3-4)，高盐组鳃中 GS 的 mRNA 表达量随时间变化逐渐降低，在 24h 时显著低于对照组(P<0.05；图 3-2)，高盐组肝中 GS 的 mRNA 表达量随时间变化先升高后降低，在 1h 处达到最高水平。对照组肝和鳃中 GP 的 mRNA 表达量随时间变化无显著性差异(P＞0.05；图 3-3；图 3-5)。高盐海组鱼鳃中 GP 的 mRNA 表达量随时间变化先升高后降低再升高，在 1h 时高盐组 GP 的 mRNA 表达量显著高于对照组(P<0.05；图 3-3)。高盐组中鱼肝中 GP 的 mRNA 表达量随时间变化先升高后降低，在 3h 处达到最高水平且显著高于对照组(P<0.05；图 3-5)。
【学位授予单位】：浙江海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S917.4

【参考文献】