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海参溶菌酶的功能、活性及其非酶抑菌活性位点的分析

发布时间:2024-04-20 04:17
  海参是我国沿海城市重要的经济养殖物种,近年来,由于集约化养殖,导致其生存环境日益恶化,使海参病害问题日益严重。研究表明,海参在面对微生物感染时,会出现两条免疫应激策略。产生抗菌肽,如海参溶菌酶,通常情况下直接破坏病原菌机体;产生过量活性氧(Reactive oxygen species,ROS)。但是,过量的ROS本身对机体具有严重的毒害作用。生物体的抗氧化防御系统(SOD和CAT),可以平衡ROS,维持机体的氧化还原平衡。因此深入研究海参的相关免疫机制,了解免疫相关蛋白的性质和功能将能有效增强海参抗病能力,对深入探讨仿刺参的抗氧化及免疫功能有着重要的作用。本研究主要深入讨论了海参溶菌酶及过氧化氢酶的作用和功能。在活体水平上,实验首次分析了海参i型溶菌酶在各个组织中的分布,初步确定了海参溶菌酶的免疫功能。研究发现,海参溶菌酶的量在触手中最多,呼吸树次之,而在肠中最少,体腔细胞和体壁中海参溶菌酶的量基本持平。灿烂弧菌免疫刺激后,海参体腔中的海参溶菌酶含量持续增加,在48 h时含量达到最多,之后海参溶菌酶含量会逐渐降低。在细胞水平上,利用基因沉默技术分析了海参i型溶菌酶对病原菌的免疫抑制作...

【文章页数】:77 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图3-1海参各组织RNA提取??

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7〇〇bp—??500bp—??图3-2内参基因(3-actin的PCR扩增??Fig.?3-2?PCR?amplification?of?the?internal?reference?gene?p-actin??30??


图3-2内参基因(3-actin的PCR扩增??

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法提取海参各个组织的总RNA。??1.5%?agarose?gel?electrophoresis??图3-1海参各组织RNA提取??Fig.?3-1?RNA?extraction?from?sea?cucumber?organizations??1.5%琼脂糖凝胶电泳检测RNA....


图3-3海参溶菌酶组织分布??Fig.?3-3?Tissue?distribution?of?sea?cucumber?lysozyme??利用RT-PCR检测海参溶菌酶蛋白在各个组织中的分布

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图3-4海参体腔细胞RNA提取??-

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取总RNA,?1.5%琼脂糖凝胶电泳检测RNA提取产物。结果显示,各个时间段提取的产??物都有三条明显的条带,与RNA条带基本一致,分别为28S、18S、5S,说明提取RNA??成功(图3-4)。对各个组织的RNA进行反转录,以内参基因验证,结果表明转录成功??(图?3-5)。?....



本文编号:3958867

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