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金口宝对兔口腔溃疡治疗作用的机制探讨

发布时间:2016-11-10 14:11

  本文关键词:金口宝对兔口腔溃疡治疗作用的机制探讨,由笔耕文化传播整理发布。


《四川医科大学》 2015年

金口宝对兔口腔溃疡治疗作用的机制探讨

陈琪  

【摘要】:目的:观察金口宝对兔口腔溃疡的作用,探讨其对兔口腔溃疡的作用机制。方法:1.选取3000g-3500g新西兰白兔72只,利用冰醋酸制作口腔溃疡的动物模型。2.制备金口宝药膜与生理盐水药膜。3.评估金口宝对兔的药物毒性作用。采用双盲法将兔随机分为2组:正常对照组(normal control group, NC组,n=6),不做任何处理;金口宝药膜组(Jin Kou Bao pellicles group, JK组,n=6),溃疡处贴敷金口宝药膜2次/天,即早上8:00,下午5:00。用药7天后,抽取腔静脉血液检测肝功、凝血、血常规;膀胱穿刺采集尿液行尿常规检验;取心脏、肾脏、肝脏标本,用HE染色,光镜下对比观察。4.观察金口宝对兔口腔溃疡的疗效。采用随机数字表法将兔随机分为3组:正常对照组(normal control group, NC组,n=18),不做任何处理;生理盐水药膜组(normal saline pellicles group, NS组,n=18),溃疡处贴敷生理盐水药膜;金口宝药膜组(Jin Kou Bao pellicles group, JK组,n=18),溃疡处贴敷金口宝药膜。2次/天,即早上8:00,下午5:00。另有6只用于口腔溃疡模型鉴定(提供正常组织和溃疡组织标本)。分别于第3 d,5 d,7 d早上8:00取兔双侧口腔黏膜组织。5.使用HE染色法(hematoxylin-eosin staining, HE)观察取材组织中的炎症细胞数目、黏膜上皮破损程度、血管数目等的情况。6.使用逆转录聚合酶联反应(reverse transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)检测口腔颊部黏膜组织中Tnf-a, bfgf, Egf基因mRNA表达情况。7.使用免疫组织化学法(Immunohistochemistry, IHC)检测口腔颊部黏膜组织TNF-α,bFGF的平均积光密度值。免疫组织化学结果采用Imageproplus-IPP图像系统半定量测定TNF-α, bFGF的平均积光密度值。8.采用SPSS17.0统计学软件,结果以均数±标准差(x±s)表示。对于单因素两水平的计量资料采用t检验,对于两因素的计量资料采用两因素方差分析,其多重比较采用Duncan方法。以a=0.05为检验水准,P0.05则有统计学意义。结果:1.利用冰醋酸烧灼法成功制备了兔口腔溃疡动物模型。2.药物毒性实验结果:JK组与NC组之间肝功、凝血、血常规及尿常规指标的差异无统计学意义(P0.05),证明金口宝无毒。3.溃疡的愈合速度:JK组快于NS组(P0.05),JK组7天愈合率为66%,平均面积为(16.23±1.37)mm2; NS组7天愈合率为16%,平均面积为(27.33±3.06)mm2。金口宝对兔口腔溃疡有治疗效果。4.HE染色切片显示:在用药的第3d,5d,7d,JK组较NS组炎症细胞少,上皮增生情况好。5. RT-PCR结果显示:①Tnf-α mRNA相对表达量:造模成功当天,NC组为0.40±0.09,低于NS组1.72±0.17,JK组1.72±0.17(P0.01)。JK组与NC组比较,其差异无统计学意义(P0.05)。在用药的第3 d,5 d,7 d,NC组Tnf-α mRNA的相对表达量分别为0.39±0.09,0.41±0.08,0.94±0.05。NS组分别为1.44±0.15,1.22±0.20,0.70±0.10。JK组分别为1.11±0.10,0.71±0.05,0.53±0.03(P0.01)。同NC、NS组比较,JK组的口腔溃疡愈合速度明显增快,且差异具有统计学意义(P0.05)。② bfgf mRNA相对表达量:造模成功当天,NC组为0.34±0.03,低于NS组0.60±0.06,JK组0.60±0.06(P0.01)。NS组与JK组比较,其差异无统计学意义(P0.05)。在用药的第3d,5d,7d, NC组bfgf mRNA的相对表达量分别为0.35±0.03,0.33±0.03,0.34±0.03。NS组分别为0.75±0.05,0.10±0.10,1.16±0.07。JK组分别为1.11±0.10,1.42±0.20,1.63±0.20。同NC、NS组比较,JK组的口腔溃疡愈合速度明显增快,且差异具有统计学意义(P0.05)。③Egf mRNA相对表达量:造模成功当天,NC组0.23±0.03,低于NS组0.44±0.03,JK组0.44±0.03(P0.01)。NS组与JK组比较,差异没有统计学意义(P0.05)。在用药的第3d,5d,7d, NC组Egf mRNA的相对表达量分别为0.27±0.03,0.19±0.08,0.233±0.03。NS组分别为0.75±0.05,0.10±0.103,1.16±0.07,JK组分别为0.90±0.08,1.48±0.15,1.72±0.13(P0.01)。同NC、NS组比较,JK组的口腔溃疡愈合速度明显增快,且差异具有统计学意义(P0.05)。6.IHC结果显示:① TNF-α平均光密度值:造模成功当天,NC组为0.23±0.031,低于NS组0.44±0.03,JK组0.44±0.03(P0.01)。NS组与JK组比较,其差异无统计学意义(P0.05)。在用药的第3d,5d,7d, NC组TNF-α的平均光密度值分别为0.27±0.03,0.19±0.081,0.23±0.03。NS组分别为0.78±0.06,0.87±0.05,1.30±0.10。JK组分别为0.90±0.08,1.48±0.15,1.72±0.13(P0.01)。同NC、NS组比较,JK组的口腔溃疡愈合速度明显增快,且差异具有统计学意义(P0.05)。②bFGF的平均光密度值:造模成功当天,NC组0.01±0.00,低于NS组0.02±0.01,JK组0.02±0.00(P0.01)。NS组与JK组比较,差异没有统计学意义(P0.05)。在用药的第3d,5d,7d, NC组bFGF的蛋白表达量分别为0.01±0.01,0.01±0.01,0.01±0.01。NS组分别为0.08±0.03,0.10±0.01,0.13±0.01。JK组分别为0.12±0.01,0.14±0.01,0.17±0.03(P0.01)。同NC、NS组比较,JK组的口腔溃疡愈合速度明显增快,且差异具有统计学意义(P0.05)。结论:1.冰醋酸烧灼法可以制备兔复发性口腔溃疡模型。2.金口宝可缩短口腔溃疡愈合时间,加快口腔溃疡创面的愈合。3.金口宝可能通过调节TNF-α, bFGF,EGF的表达促进口腔溃疡愈合。

【关键词】:
【学位授予单位】:四川医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R276.8
【目录】:

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