PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的干预研究

发布时间：2023-01-26 01:24

　　目的锰（Mn）是人体必需微量元素,参与身体各种重要的生理过程。但长期过量锰暴露会引起锰中毒,损害椎体外系和学习记忆力。海马是主导学习记忆的主要脑区,也是锰中毒累及的主要脑区之一。据研究,锰暴露激活小鼠海马小胶质细胞,NOD样受体蛋白3（Nlrp3）炎性体表达增高,炎症反应增强。细胞内质网应激（ERS）可促进细胞氧化应激,进而诱导硫氧还蛋白互作蛋白（Txnip）高表达,并激活Nlrp3炎症小体。对氨基水杨酸钠（PAS-Na）属于非甾体抗炎药,具有抗炎、抗氧化作用,可抑制小胶质细胞的活化和炎症反应,且本团队此前研究发现PAS-Na治疗对锰中毒患者疗效较好。因此,本研究拟通过体内外实验探讨PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症小体信号通路介导锰神经毒性的干预作用机制。方法1体外研究:体外试验选大鼠小胶质细胞系-HAPI细胞为研究对象。（1）首先用噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度锰、PAS-Na暴露24h后的HAPI细胞存活率;（2）药物试验分组及处理如下:①锰损伤模型:分为对照、低、中、高锰组,分别给予0、50、100、200 μmol/L（μM）Mn暴露;②PAS-Na干预组:分为... 

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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的体外干预研究
    1 材料
        1.1 主要仪器
        1.2 主要试剂
    2 方法
        2.1 细胞培养及传代
        2.2 细胞药物处理染毒
        2.3 荧光定量PCR
        2.4 Western Blot实验
        2.5 Elisa实验
        2.6 细胞ROS检测
        2.7 数据处理
    3 结果
        3.1 不同浓度锰、PAS-Na暴露对HAPI细胞存活率的影响
        3.2 PAS-Na对染锰HAPI细胞凋亡相关基因表达的影响
        3.3 PAS-Na对染锰HAPI细胞炎症因子释放的影响
        3.4 PAS-Na对染锰HAPI细胞炎症小体表达的影响
        3.5 PAS-Na对染锰HAPI细胞氧化损伤的影响
        3.6 PAS-Na对染锰HAPI细胞IRE1表达的影响
        3.7 TUDCA对染锰HAPI细胞Txnip/Nlrp3信号通路的影响
        3.8 Resveratrol对染锰HAPI细胞Txnip/Nlrp3信号通路的影响
    4 讨论
第二部分 PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的体内干预研究
    1 材料
        1.1 仪器与试剂
        1.2 主要试剂
    2 方法
        2.1 动物饲养
        2.2 大鼠学习记忆能力测试
        2.3 大鼠样本的采集与处理
        2.4 大鼠海马超微结构观察
        2.5 免疫组化
        2.6 相关元素含量测定
        2.7 荧光定量PCR
        2.8 Western Blot实验
        2.9 Elisa实验
        2.10 数据处理
    3 结果
        3.1 染锰对大鼠生长发育的影响及PAS-Na的干预作用
        3.2 染锰对大鼠血、脑锰的影响及PAS-Na的干预作用
        3.3 PAS-Na对染锰大鼠学习记忆的影响
        3.4 PAS-Na对染锰大鼠海马损伤的影响
        3.5 PAS-Na对染锰大鼠海马炎症因子表达的影响
        3.6 PAS-Na对染锰大鼠海马炎症小体表达的影响
        3.7 PAS-Na对染锰大鼠海马氧化损伤的影响
        3.8 PAS-Na对染锰大鼠海马Txnip表达的影响
        3.9 PAS-Na对染锰大鼠海马IRE1表达的影响
    4 讨论
总结
结论
参考文献
附录
综述
    参考文献
致谢
博士期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]α-突触核蛋白在锰诱导神经细胞内质网应激中的作用[J]. 谭璇,徐斌,王璨,闫冬莹,刘畅,马卓,刘巍,邓宇,徐兆发.  中国工业医学杂志. 2018(04)
[2]对氨基水杨酸钠对锰染毒大鼠丘脑原代小胶质细胞氧化损伤及炎症反应的影响[J]. 彭东杰,罗旖旎,秦文霞,梁典胤,谢秉言,许放,李少军,姜岳明.  环境与职业医学. 2018(04)
[3]牛磺酸对染锰所致大鼠丘脑氨基酸类神经递质改变的干预作用[J]. 耿立敏,郭松超,雷丹青,陆彩玲,何以源.  广西医科大学学报. 2012(05)
[4]对氨基水杨酸钠对染锰大鼠基底核GABAAR及GAT-1表达的影响[J]. 欧超燕,罗海兰,姜岳明,王禅,蒙浩洋,姜力,区仕燕,邓祥发.  环境与职业医学. 2012(05)
[5]对氨基水杨酸钠对染锰大鼠基底核氨基酸类神经递质含量的影响[J]. 欧超燕,黄明立,姜岳明,罗海兰,邓祥发,王禅,王芳,黄晓薇.  中华预防医学杂志. 2011 (05)
[6]对氨基水杨酸钠对染锰大鼠学习记忆及海马GFAP阳性细胞表达的影响[J]. 刘翃,罗海兰,钟祥海,邓祥发,吴飞盈,王禅,韦义萍,廖海涛,姜岳明.  工业卫生与职业病. 2011(02)
[7]多糖复合物对鲫鱼躯体生化组成、脏器指数及白细胞数目的影响[J]. 刘军,陈爱敬,胡先勤,汪明,黄峰,荣克明.  饲料工业. 2009(24)
[8]焊接工人苍白球MRIT1加权检查显示高密度影的神经系统表现[J]. Josephs K.A.,Ahlskog J.E.,Klos K.J.,史利利.  世界核心医学期刊文摘(神经病学分册). 2005(10)
[9]PAS-Na治疗30例电焊工慢性锰中毒的临床观察[J]. 董国强,张建余.  职业卫生与病伤. 2001(02)

博士论文
[1]程序性坏死参与锰致神经元死亡机制的研究[D]. 磨洁琳.广西医科大学 2018
[2]PAS-Na对染锰大鼠脑炎症反应的影响[D]. 李少军.广西医科大学 2017
[3]NLRP3炎症体介导的小胶质细胞炎症反应在锰神经毒性中的作用[D]. 王迪雅.第四军医大学 2016
[4]PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的影响[D]. 欧超燕.广西医科大学 2012
[5]锰对海马依赖学习记忆的损伤及牛磺酸的干预研究[D]. 陆彩玲.广西医科大学 2011
[6]对氨基水杨酸钠（PAS-Na）对锰致大鼠大脑边缘系统损伤的干预机制研究[D]. 邓祥发.广西医科大学 2010

硕士论文
[1]PAS-Na对锰致BV2细胞NF-κβ/NLRP3/Caspase-1通路的影响的干预作用[D]. 彭东杰.广西医科大学 2018
[2]PAS-Na对锰致大鼠原代小胶质细胞炎症损伤干预作用的研究[D]. 罗旖旎.广西医科大学 2017
[3]PAS-Na对锰致大鼠海马炎症反应的影响[D]. 袁宗祥.广西医科大学 2016
[4]肿瘤坏死因子受体相关因子3（TRAF3）在锰诱导小胶质细胞炎症反应中的作用研究[D]. 王晓静.第四军医大学 2016
[5]cAMP信号通路在锰致大鼠学习记忆功能障碍中的作用[D]. 梁桂强.广西医科大学 2015
[6]对氨基水杨酸钠对染锰大鼠体内金属元素、学习记忆及海马超微结构的影响[D]. 陈海滨.广西医科大学 2009



本文编号：3732010