石蒜组织培养及试管鳞茎膨大研究

发布时间：2019-09-25 08:22

【摘要】：石蒜是一类集观赏、药用与工业价值于一体的经济植物,广泛应用于植物景观配置和药用生产等领域。近年来市场对石蒜的需求量日益增加。加快石蒜栽培速率,提高石蒜生产量成为石蒜产业化生产亟需解决的问题。本研究以石蒜的不同器官如鳞茎、石蒜种胚,组培苗叶片等为外植体,从无菌体系的建立、愈伤组织与不定芽的诱导、愈伤组织的增殖分化、试管鳞茎膨大与增殖等环节开展石蒜组培快繁技术体系的研究。旨在为石蒜试管苗生产和壮大提供技术支撑,为石蒜属其他植物的组培快繁技术提供理论依据。主要研究结果如下:1石蒜无菌体系的建立。采用10%次氯酸钠对石蒜鳞茎、鳞片消毒,筛选出比较适宜的消毒方法是:将鳞茎切成带基盘的双鳞片,用酒精消毒30 s后,再用10%次氯酸钠加0.1 ml 2%SDS(十二烷基硫酸钠)浸泡25 min。可以使污染率控制在13.29%,褐化率控制在5.26%,存活率达81.45%。2石蒜愈伤组织与不定芽的诱导。在比较了石蒜鳞片、叶片与种胚的诱导效果后,认为鳞片为适合诱导愈伤组织与不定芽的外植体。筛选出适合鳞片诱导愈伤组织与不定芽的培养基为MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率为51.55%,不定芽诱导率为31.07%,总诱导率为82.62%。3石蒜愈伤组织的增殖与分化。采用完全随机设计,研究不同激素浓度配比对石蒜愈伤组织增殖及不定芽分化的影响。筛选出适合愈伤组织增殖的培养基为MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,50-60 d后增殖系数达3.02。适合愈伤组织分化的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,50-60 d后分化率达92.58%,平均分化芽数5.53个。4试管鳞茎的膨大与增殖。采用L9(34)正交试验设计,研究大量元素浓度、蔗糖浓度和活性炭含量对石蒜鳞茎膨大的影响。筛选出适宜的鳞茎膨大培养基为MS+蔗糖40 g/L+活性炭1.0 g/L,鳞茎鲜重可达860 mg,增重6.62倍,直径达1.0 cm。植株移栽至含蛭石的栽培基质中,成活率很高。将膨大后直径约1.0 cm的鳞茎采用四分法切分,置于MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中增殖,增殖系数为3.38。
【图文】：

6170.965 4 1542.741 24.150 表 3-1-3 鳞片灭菌效果多重比较Tab. 3-1-3 Duncan test on the disinfection effect of scales率）差异显著性 褐化率(%)差异显著性 存活（%0.05 0.01 0.05 0.01 .03 a A 0 b B 67..05 a A 0 b B 68..29 b AB 5.26 b B 81..14 b B 54.08 a A 35..03 b B 61.29 a A 29.5显著水平，大写字母表示0.01极显著水平，字母相同表示差异不显著。多重直观的反映了10% NaClO不同时间的消毒效果：平均污染小，从20 min升至25 min时，污染率降低的幅度较大，消度平缓。平均褐化率与消毒时间呈正相关关系，15-25 mi时间大于25 min，褐化率明显提升，接近60%。平均存活先增后减的趋势，15-25 min之间存活率逐渐提升，超过5 min时，存活率取得最高峰值。

g/L、3.0 mg/L 时，只有鳞片能够诱导不定芽；6-BA 浓度为 5.0 mg/L、7.0 m片的不定芽诱导率分别是叶片的 3.14 倍、10.06 倍。从总诱导率这一指标看，仍是鳞片的诱导效果最好（图 3-2）。6-BA 浓度g/L、7.0 mg/L 时，鳞片的总诱导率是叶片的 8.35 倍、13.41 倍。综合比较，，导能力强弱表现为：鳞片>叶片>种胚。推荐在石蒜的组织培养中，采用带鳞片作为外植体。
【学位授予单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S682.29

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本文编号：2541340