UL122转基因鼠模型的建立及该蛋白对神经系统的影响

发布时间：2022-05-03 02:53

　　人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）是一种双链的DNA病毒,属于β疱疹病毒亚科。CX43属于缝隙链接蛋白家族成员,有关实验数据表明HCMV能够下调CX43的表达水平。NMDARS为在神经细胞中发现的谷氨酸受体和离子通道蛋白,其表达与学习记忆能力有着密切的联系。IE2由病毒基因UL122编码,在病毒的复制和许多疾病的病理过程中起到重要作用。先前的研究表明,在孕妇中,原发或新的HCMV感染均可引起新生儿宫内感染或围产期感染,可导致胎儿畸形,智力低下或发育迟缓等。据报道,HCMV孕期感染与新生儿迟发性神经损伤密切相关,先天性HCMV感染导致学习和记忆障碍,但HCMV IE2是否在这一过程中起关键作用尚不清楚。由于种属特异性,先前对HCMV IE2的研究仅限于细胞和分子水平。为了进一步在整体水平上研究HCMV IE2是否通过影响转基因小鼠海马神经元NMDA受体和CX43表达水平来间接影响小鼠的学习记忆能力首先,建立了能稳定持续表达IE2蛋白的ul122转基因小鼠模型。然后将小鼠分为实验组（阳性小鼠）和对照组（野生型小鼠）。每个组n=24。用PCR技术鉴定了ul1... 

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
实验材料
    1 实验动物
    2 主要实验仪器及材料
    3 主要实验试剂来源及配制方法
实验方法
    1 ul122转基因鼠建模、繁殖和鉴定
    2 水迷宫实验测试转基因鼠的学习记忆能力
    3 小鼠海马HE染色,观察IE2对小鼠海马细胞形态影响
    4 Western-blot检测IE2对小鼠海马CX43蛋白表达的影响
    5 免疫组化检测IE2、CX43、NMDARS在ul122转基因阳性鼠和WT野生型鼠中的差别
    6 统计学分析
结果与分析
    1 转基因鼠DNA的提取和PCR
    2 水迷宫实验测试空间记忆能力在野生型和UL122阳性转基因鼠中的差别
    3 HE(hematoxylin-eosin)染色显示IE2造成了UL122转基因小鼠海马神经元的损伤
    4 免疫组化分别观察IE2在幼龄鼠、成年鼠、老龄鼠中的表达情况
    5 免疫组化结果显示IE2在UL122转基因鼠海马组织中下调了CX43的表达
    6 免疫组化结果显示IE2在UL122转基因鼠海马组织中下调了NR1的表达
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Immediate–Early（IE） gene regulation of cytomegalovirus:IE1-and pp71-mediated viral strategies against cellular defenses[J]. Lilith Torres,Qiyi Tang.  Virologica Sinica. 2014(06)



本文编号：3650483