连环素p120调控NF-κB活化在气道炎症反应中的作用及其分子机制

发布时间：2023-03-11 17:46

　　一、目的 本实验采用脂多糖(LPS)刺激体外培养的人气道上皮细胞建立气道上皮炎症反应模型,检测连环素p120(简称p120)蛋白的表达变化、NF-kB信号通路的活化及其下游靶基因IL-8的表达变化,初步探讨人体气道炎症发生的分子机制。 二、方法 根据MTT结果及本实验室前期研究,选取20μg/ml LPS作为致炎因子处理培养的人气道上皮细胞；运用免疫荧光、细胞核浆分离提取蛋白及Western blot技术检测刺激前后p120、抑制蛋白IkBa及NF-kB亚基p65蛋白表达的改变及p65是否发生核内转位；运用ELISA和荧光实时定量PCR技术分别检测IL-8表达量的改变；运用瞬时转染及特异性siRNA技术以增强或敲低细胞中p120的表达,进一步验证p120与NF-kB信号通路之间的关系。 三、结果 Ⅰ.Western blot、荧光实时定量PCR及免疫荧光染色证实p120存在于人气道上皮细胞中,而且,与对照组比较,LPS刺激后p120蛋白表达下调。 Ⅱ.细胞核浆分离提蛋白及Western blot技术检测发现LPS刺激人气道上皮细胞后,NF-κB信号通路活化——NF-κB p65总蛋白表...

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

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主要缩略词表
中文摘要
Abstract
第一部分 脂多糖诱导气道炎症反应中连环素pl20对NF-kB信号通路的影响
    前言
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 气道炎症中pl20调控的NF-kB活化部分依栽RhoGTP酶家族蛋白Rho A
    前言
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
综述一
    参考文献
综述二
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3759967