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核因子-κB信号通路参与人骨髓间充质干细胞增殖/凋亡调节

发布时间:2023-10-12 04:35
  目的:探讨核因子кB(Nuclear Factor-кB,NF-кB)信号通路是否参与调节人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)的增殖及凋亡作用。 材料和方法:(1)贴壁法获取骨髓间充质干细胞:取股骨头置换或全髋关节置换患者股骨髓腔内骨髓血混合物,通过差速贴壁法分离培养纯化鉴定骨髓间充质干细胞,进行形态学观察。(2)流式细胞术鉴定表面分子表达:采用细胞表面分子标志流式抗体荧光染色后,用流式细胞方法检测细胞表面分子表达。(3)应用蛋白凝胶电泳(western blotting)的方法检测药物干预(激活剂脂多糖,Lipopolysaccharides,LPS;抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐,PDTC)后NF-кB表达水平以及增殖、凋亡相关蛋白变化。(4)另用蛋白凝胶电泳分别检测相关蛋白如PARP、PCNA等蛋白表达的变化。(5)细胞增殖检测:用MTT比色方法检测骨髓间充质干细胞在LPS及PDTC的作用下其增殖的变化。(6)细胞凋亡检测:通过将细胞标记PI后进行流式细胞分析检测在NF-кB信号通路激活后细胞凋亡变化。 结果:(1)从手术中人股...

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

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英文摘要
引言
第一部分 骨髓间充质干细胞的分离培养纯化鉴定
    1.1 实验材料与主要试剂及仪器
    1.2 主要实验方法
    1.3 实验结果
    1.4 讨论
    1.5 小结
第二部分 NF-кB 参与间充质干细胞增殖调节
    2.1 实验材料与主要试剂及仪器
    2.2 主要实验方法
    2.3 实验结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
结论
参考文献
致谢
综述
    参考文献



本文编号:3853462

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