树鼩免疫细胞交叉反应性抗体筛选与表型分析

发布时间：2024-05-23 04:31

　　目的:树鼩是一种小型哺乳动物,属攀鼩目、树鼩科。树鼩的亲缘关系与灵长类很接近,其实验研究结果易于应用到人类的医学生物学研究当中。科学家们成功地驯化和培育了一定数量的树鼩,并广泛用于疾病模型的建立。同时,还建立了一系列有关树鼩作为实验动物的标准。免疫系统在机体抵抗外界环境中各类微生物、毒素和致癌物质等方面都起着非常重要的作用,免疫应答的监测是动物模型应用中不可缺少的部分。而树鼩免疫系统信息的缺乏,导致我们不能深入地研究疾病的致病机理,以及研究疾病的防治措施。因此,对于树鼩的免疫系统的研究与分析显得尤为重要,本文主要对树鼩免疫细胞表型进行分析和研究。方法:1.比较四种试剂裂解树鼩外周血红细胞的效果,然后选取可以使细胞成群分布、分界明显,而且红细胞裂解更为完全的裂解液,对其进行优化,包括裂解液与全血的体积比、单次裂解时间、裂解次数和外周血起始体积等。2.基于“针对某一种属抗原的抗体可能存在与其它种属的同类抗原的交叉反应性”,我们从商业化的抗体中进行抗体筛选。通过流式细胞分析进行抗体的交叉反应性分析,找出反应性最强的抗体克隆。3.利用筛选出的具有交叉反应性的抗体对树鼩免疫细胞表型进行分析。通过...

【文章页数】：117 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．树齣研宄现状与展望??Ｆｉｇｕｒｅ?１．?Ｐｒｏｇｒｅｓｓ?ａｎｄ?ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ?ｏｆ?ｔｒｅｅ?ｓｈｒｅｗ?ｒｅｓｅａｒｃｈ??

神经系统Ｉ７］、视觉系统［８］、动物模型和分类学［１Ｇ］等方面己经进行了大量的研究，??并且有了较为全面和深入的了解，而在基因克隆和功能［ｕ，１２］以及感染和免疫学⑴］??等领域的还需要进一步深入研究（图１）。近年来，对树駒的研究呈现出较为全??面、快速的现象，可以预见树駒将会在....

图２．１树齣组织细胞流式分析模式图??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｃｅｌｌｓ?ｆｒｏｍ?ｔｒｅｅ?ｓｈｒｅｗ?ａｎａｌｙｚｅｄ?ｖｉａ?ｆｌｏｗ?ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ??

１００?Ｐ１，一８４ｕｌ（液）里加入１６?ｕｌ抗体，然后从第一管样品中取出５０?ｕｌ加入第二管的５０?ｕｌ稀??释液中，接下来从第二管中取出５０?ｕｌ加入至第三管的５０?ｕｌ稀释液中，最后从??第三管中取出５０?ｙ丨加入至第四管的５０?ｐ?１稀释液中。最后向每个管中加入５０?ｕ?....

图２．１０ａ）

在吉母萨染色实验中，与未标记ＰＥ荧光抗体的样品相比，磁珠分选后的??ＣＤ２０＋细胞样品中，具有比例较高的高核质比细胞，但磁珠分选出的树駒ＣＤ２０＋??细胞较少（图２．１１）。??ＰＥ?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??■■■??ｕｎｓｔａｉｎｅｄ！?；?．??Ｂｅｆｏｒｅ?、?！?；?：：....

图２．１０磁珠分选后免疫荧光检测??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１０?Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ａｆｔｅｒ?ｍａｇｎｅｔｉｃ?ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ??注：ａ小鼠脾脏（２０Ｘ），ｂ树駒脾脏（２０Ｘ）

＊?＊??图２．１１树駒骨髓样品磁珠分选后吉母萨分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１１?Ｇｅｍｍａ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｂｏｎｅ?ｍａｒｒｏｗ?ｓａｍｐｌｅ?ｆｒｏｍ?ｔｒｅｅ?ｔｈｒｅｗ?ａｆｔｅｒ?ｍａｇｎｅｔｉｃ?ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ??注：ａ．ｕｎｓｔａｉｎｅｄ?样品（１００....

本文编号：3981004