糖皮质激素影响间充质干细胞成骨分化的实验研究

发布时间：2024-05-18 02:30

　　目的探讨Notch信号通路在糖皮质激素影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)成骨分化过程中的作用。方法培养MSCs,给予糖皮质激素(glucocorticoids, GCs)处理,计算凋亡率,分析细胞凋亡情况;通过real-time PCR方法,检测细胞内Notch信号通路靶基因Hes1和成骨相关基因(ALP,Col1agen1)mRNA的表达;通过Western blot方法检测Notch信号通路靶基因Hes1和成骨相关基因蛋白的表达;应用茜素红染色,检测细胞内成骨钙化作用。结果 GCs处理后,凋亡细胞增加[(80±5.789)vs对照组(60±7.132),P<0.05];MSCs成骨分化相关基因ALP、Collagen1mRNA和蛋白表达明显减低,与对照组相比,P<0.05;茜素红染色显示GCs组染色强度与对照组相比显著降低(P<0.05)。同时,Notch信号通路靶基因Hes1表达明显降低(与对照组相比,P<0.05),Notch信号通路表达明显受到抑制。激活Notch信号通路,细胞凋亡百分率降低为72±2.169(...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养和分组
    1.3 检测指标
        1.3.1 细胞凋亡分析:
        1.3.2 RNA提取和real-time PCR检测:
        1.3.3 Western blot 蛋白表达检测:
        1.3.4 茜素红染色:
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 GCs处理对MSCs凋亡的影响。
    2.2 GCs处理对MSCs中Notch信号通路表达的影响
    2.3 GCs处理对MSCs成骨分化的影响
3 讨论



本文编号：3976322