伊维菌素抑制白纹伊蚊体内2型登革病毒效果与机制研究

发布时间：2024-05-25 06:42

　　目的:拟在实验室内研究伊维菌素(IVM)对白纹伊蚊体内2型登革病毒(DENV 2)生长和繁殖是否具有抑制作用,初步探索IVM具有这一抑制作用的机制,为后续研究,乃至将IVM应用于登革热蚊媒防控而特异性杀灭白纹伊蚊体内2型登革病毒提供理论基础。方法:一是通过开展病原体人工感染蚊媒的实验,确定蚊虫体内病原体感染率高低、载量大小,及它们随饲养时间变化趋势等媒介效能相关参数,阐明影响实验的相关因素,包括受试对象、病毒类型、人工感染方式、血餐中病毒载量、人工感染以及饲养时环境温度与湿度等,从而建立理想的白纹伊蚊人工感染DENV 2实验室模型(n=20,设3个重复,此处样本量为最终纳入统计分析数量,下同);二是分别在白纹伊蚊吸食含DENV2血餐时(n≥30)和吸食后第4天(n≥20,设3个重复),通过血餐给予各浓度IVM干预,饲养至第10天,检测各组蚊虫体内DENV2感染率、病毒载量;分析各干预点蚊虫感染率、病毒载量随伊维菌素浓度变化趋势。三是通过比较吸食DENV2血餐后,病毒载量降低或转阴组、上升或不变组间白纹伊蚊(n≥20)体内11个miRNA(包括miR-4448、miR-1767、miR-...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图４吸血中的白纹伊蚊??Ｔｈｅ?ｂｌｏｏｄ－ｆｅｅｄｉｎｇ?ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ??１０??

（一）材料??１、白纹伊蚊??本研宄受试对象为３？５日龄白纹伊蚊驯化蚊（图４），由中国疾病预防控制??中心寄生虫病预防控制所提供。蚊虫养殖的条件为：温度２８±１°Ｃ，相对湿度??（７０±１０）％，自然光照，幼虫以鼠食喂食，成蚊以１０％葡萄糖水维持喂食，羽化??后３？５日龄时用于实....

图５白纹伊蚊成蚊伺养或人工感染情形?

图５白纹伊蚊成蚊伺养或人工感染情形?图６自制改进的吸蚊器??Ｔｈｅ?ｓｉｔｕａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ａｅｄｅｓ?ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ?ｒｅａｒｉｎｇ?ｏｒ?Ｔｈｅ?ｓｅｌｆ－ｉｍｐｒｏｖｅｄ?ｍｏｓｑｕｉｔｏ?ｔｒａｐ??ｂｅｉｎｇ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＤＥＮＶ?２??ｅ）质量....

图７?４０倍物镜下半贴壁匸６／３６细胞?

二、结果??（一）细胞培养情况??贴壁Ｃ６／３６及ＢＨＫ－２１细胞如图７，８，９。本次研究中，Ｃ６／３６细胞培养至第４??天时长满９０％培养瓶瓶底，故４天可传一代；同理，ＢＨＫ－２１细胞３天可传一代。??为获得更高浓度的细胞，本实验采用开口?Ｔ－７５培养瓶培养传代细胞，经细胞计?....

图１１１０倍物镜下正常Ｃ６／３６细胞?

图１１１０倍物镜下正常Ｃ６／３６细胞?图１２?１０倍物镜下感染ＤＥＮＶ?２的Ｃ６／３６细胞?空泡??Ｔｈｅ?ｎｏｒｍａｌ?Ｃ６／３６?ｃｅｌｌｓ?ｕｎｄｅｒ?ｔｈｅ?ｌ〇ｘ?Ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?Ｃ６／３６?ｃｅｌｌｓ?ｗｉｔｈ?ＤＥＮＶ?２?ｕｎｄｅｒ?ｔｈｅ??ｏｂｊｅｃ....

本文编号：3981857