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转录因子Sp1、E2F1调控AQP3表达影响细胞迁移、侵袭分子机制研究

发布时间:2024-05-08 23:55
  一、目的水通道蛋白(AQPs)是一种很小的、固有的膜蛋白,它能促进水、甘油、尿素等在细胞浆膜上的运输而参与许多生理和病理过程。AQP3在“着床窗口期”的人子宫内膜中高表达,并能促进高接受态子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭,促进胚胎着床的顺利进行,但对AQP3的转录调控机制研究较少。转录因子Sp1为哺乳动物细胞中发现的第一个转录因子,通过调节相关基因表达,介导肿瘤生长和转移。转录因子E2F1主要参与调控细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡和分化相关基因表达。本文通过预测并选定与AQP3启动子结合的转录因子Sp1、E2F1等,并通过染色质免疫共沉淀实验和双荧光素酶报告基因分析转录因子Sp1、E2F1是否可与AQP3启动子结合,干扰和过表达转录因子Sp1、E2F1分析是否影响AQP3表达,探讨AQP3介导子宫内膜癌细胞迁移、侵袭的分子机制。二、方法1、通过生物信息学方法预测与AQP3启动子结合的转录因子,结合文献将转录因子Sp1、E2F1、NF-κB1作为初步研究对象;2、利用脂质体转染法将购买的小干扰RNA(si-NC、si-Sp1、si-E2F1、si-NF-κB1)转染到Hela细胞中,通过实时定量...

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