自噬对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的影响
目的 支气管哮喘是多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。近来研究发现肺泡巨噬细胞在肺部慢性疾病(例如支气管哮喘、慢性阻塞性肺病)中起着重要的作用,肺泡巨噬细胞是气道炎症性疾病的主要效应细胞之一,能有效地识别、结合并清除病原体,释放多种生物活性物质参与气道免疫防御反应,巨噬细胞受体介导变异原的识别是炎症反应调节的重要机制。但是肺泡巨噬细胞在支气管哮喘中的作用机制尚不清楚。本实验假设巨噬细胞自噬过程可能影响其吞噬作用,,探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌,S.aureus)对巨噬细胞自噬的影响,并研究其在巨噬细胞吞噬病原微生物中的作用。 方法 以小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,以磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol3-Kinase,PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)为干预药物,实验分对照组(Con)、实验组(S.aureus)、3-MA抑制组(S.aureus+3-MA)。金黄色葡萄球菌刺激细胞后,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相关蛋白Rac1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬、吞噬现象。 结果 1.金黄色葡萄球菌感染诱导RAW264.7自噬蛋白LC3II和PI3K在感染后1h表达最强(P0.05); 2.3-MA预处理组自噬相关蛋白Beclin1和LC3表达量显著降低(P0.05);自噬颗粒聚集显著降低(P0.05); 3.吞噬金黄色葡萄球菌吞噬率显著降低及Rac1蛋白表达显著降低(P0.05)。 结论 1.金黄色葡萄球菌诱导的自噬增强了巨噬细胞吞噬能力; 2.自噬抑制剂3-MA抑制PI3K活性的同时,减弱了巨噬细胞自噬吞噬金黄色葡萄球菌的能力。
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R562.25
【目录】:
【共引文献】
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本文编号:173584
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