母体运动对孕中期大鼠七氟醚吸入所致子代认知损伤的改善作用及机制研究

发布时间：2023-03-12 02:04

　　目的:随着麻醉理念的更新及麻醉技术的进步,麻醉已不局限于提供良好的手术条件、保障患者术中安全,全麻药物神经毒性这一议题引起社会广泛关注和讨论。由于生育政策的调整,我国孕妇数量剧增,同时高龄产妇的构成比上升,胎儿发育不良及致畸率明显增高。得益于胎儿宫内治疗技术的迅猛发展,部分胎儿疾病能够在出生前得到干预和治疗,而孕妇妊娠期间行非产科手术麻醉的病例越来越多。目前研究发现,各类全身麻醉药物对脑发育期中枢神经系统均具有潜在神经毒性作用,因此迫切需要采取相应的措施来有效减轻全身麻醉药物所致的脑发育期神经毒性。临床研究表明孕妇怀孕期间常规的运动锻炼有益于子代脑发育。多项啮齿类动物实验也证实生理状态下妊娠期跑台训练、游泳、自由转轮等多项母体运动有利于提高子代认知功能。其可能的机制涉及多个层面:促进神经发生、促进神经因子表达、促进长时程增强、提高抗氧化能力等。然而目前,母体运动对妊娠期麻醉暴露所致子代神经毒性的影响及机制尚不清楚。表观遗传修饰是指DNA序列不发生变化的情况下,基因表达发生可遗传改变,是机体普遍存在的基因调控方式之一。表观遗传修饰在神经科学领域,特别是脑发育和神经退行性病变中发挥重要作用...

【文章页数】：95 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 :孕中期大鼠单次与多次七氟醚吸入对子代神经发育的影响
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 实验仪器
        2.2 实验动物模型
            2.2.1 实验动物
            2.2.2 动物合笼
            2.2.3 实验分组
            2.2.4 麻醉处理
        2.3 Western blot蛋白分析
            2.3.1 蛋白提取
            2.3.3 BCA法测定蛋白浓度及蛋白变性
            2.3.3 配胶及电泳
            2.3.4 转膜、封闭及一抗孵育
            2.3.5 二抗孵育及显影
        2.4 神经行为学测试
            2.4.1 旷场试验(Open field test,OFT)
            2.4.2 悬吊试验(Suspension test)
            2.4.3 平衡木试验(Beam balance test,BBT)
            2.4.4 Morris 水迷宫测试(Morris water maze tests, MWM)
        2.5 海马病理学观察
            2.5.1 尼氏染色(Nissl staining)
            2.5.2 高尔基染色(Golgi staining)
        2.6 统计学分析
    3 结果
        3.1 孕鼠及仔鼠一般状况的观察
        3.2 孕中期七氟醚吸入对子代脑组织或海马组蛋白乙酰化水平、BDNF表达的影响
        3.3 孕中期七氟醚吸入对子代大鼠神经行为学的影响
            3.3.1 对自主活动能力和焦虑情绪的影响
            3.3.2 对感觉运动的影响
            3.3.3 对空间学习记忆能力的影响
        3.4 孕中期七氟醚吸入对子代大鼠海马CA1区神经元密度及树突棘密度的影响
        3.5 孕中期七氟醚吸入对子代大鼠海马突触相关蛋白表达的影响
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :母体运动对孕中期大鼠七氟醚吸入所致子代认知损伤的改善作用及与BDNF/TrkB信号通路的关系
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 实验仪器
        2.2 实验动物模型
            2.2.1 实验动物
            2.2.2 动物合笼
            2.2.3 实验分组
            2.2.4 麻醉处理
            2.2.5 跑台训练
            2.2.6 药物注射
        2.3 Western blot蛋白分析
            2.3.1 蛋白提取
            2.3.2 BCA法测定蛋白浓度及蛋白变性
            2.3.3 配胶及电泳
            2.3.4 转膜、封闭及一抗孵育
            2.3.5 二抗孵育及显影
        2.4 Morris水迷宫测试(Morris water maze tests,MWM)
        2.5 海马病理学观察
            2.5.1 尼氏染色(Nissl staining)
            2.5.2 高尔基染色(Golgi staining)
        2.6 统计学分析
    3 结果
        3.1 母鼠跑台训练期间体重变化
        3.2 母体跑台训练减轻七氟醚所致子代大鼠认知损伤及ANA-12 的逆转作用
        3.3 母体跑台训练减轻七氟醚所致子代大鼠海马神经元损伤及ANA-12 的逆转作用
        3.4 母体跑台训练减轻七氟醚所致子代大鼠海马突触相关蛋白降低及ANA-12 的逆转作用
        3.5 母体跑台训练激活BDNF/TrkB/Akt信号通路减轻七氟醚致子代大鼠神经毒性作用
    4 讨论
    5 结论
第三部分 :p300介导的组蛋白乙酰化修饰在母体运动改善孕中期大鼠七氟醚吸入所致子代认知损伤中的作用及机制
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 实验仪器
        2.2 实验动物模型
            2.2.1 实验动物
            2.2.2 动物合笼
            2.2.3 实验分组
            2.2.4 麻醉处理
            2.2.5 跑台训练
            2.2.6 药物注射
        2.3 Western blot蛋白分析
            2.3.1 蛋白提取
            2.3.2 BCA法测定蛋白浓度及蛋白变性
            2.3.3 配胶及电泳
            2.3.4 转膜、封闭及一抗孵育
            2.3.5 二抗孵育及显影
        2.4 免疫荧光
        2.5 Morris水迷宫测试(Morris water maze tests,MWM)
        2.6 海马病理学观察
            2.6.1 尼氏染色(Nissl staining)
            2.6.2 高尔基染色(Golgi staining)
        2.7 统计学分析
    3 结果
        3.1 p300 抑制剂对子代大鼠p300、Ace-H3K14/27及BDNF/TrkB/Akt信号通路的影响
        3.2 p300 抑制剂阻断母体运动对子代大鼠学习记忆能力损伤的改善作用
        3.3 p300 抑制剂阻断母体运动对子代大鼠神经元损伤的改善作用
        3.4 p300 抑制剂阻断母体运动对子代大鼠突触可塑性损伤的改善作用
    4 讨论
    5 结论
    本论文创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3760712