脂联素亚型及浓度对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞促炎作用的影响

发布时间：2017-09-29 19:23

  本文关键词：脂联素亚型及浓度对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞促炎作用的影响

  更多相关文章： 脂联素 亚型 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞

【摘要】：目的:1.明确不同亚型脂联素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞分泌相关炎症因子的作用是否存在差异;2.探讨同一亚型脂联素的浓度与类风湿关节炎滑膜成纤维细胞分泌炎症因子作用程度的关系。方法:获取明确诊断为类风湿关节炎的患者及健康人的关节滑膜组织,分离培养出类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)及健康人滑膜成纤维细胞(HFLS);分别用Native、HMW/MMW、Trimeric三种脂联素以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml三个浓度刺激上述两种滑膜成纤维细胞15小时,收集细胞培养上清液;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测其中基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、血管内皮生长因子(VEGF)及前列腺素E2(PGE2)的浓度。结果:三种脂联素在25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml浓度水平均可刺激RASF和HFLS分泌MMP-3、MMP-10、TNF-α、VEGF、PGE2的水平升高,且与未刺激细胞相比有显著统计学差异(P0.01)。与相同浓度脂联素刺激的HFLS相比,脂联素刺激后RASF分泌炎症因子的水平明显升高,且有统计学差异(P0.05)。各亚型脂联素刺激RASF分泌炎症因子的作用随浓度增加而增大,并以HMW/MMW亚型作用最显著。结论:1.三种脂联素可能通过刺激RASF分泌MMP-3、MMP-10、TNF-α、VEGF、PGE2发挥促炎作用,并且HMW/MMW亚型的作用最强;2.由于HMW/MMW亚型脂联素可导致RASF分泌MMP-3、MMP-10、TNF-α、VEGF、PGE2增多,因此提示HMW/MMW亚型脂联素在类风湿关节炎关节内基质破坏及滑膜血管生成等发病机制中发挥重要作用;3.降低关节液中脂联素浓度,特别是HMW/MMW亚型,可能是治疗类风湿关节炎的新策略。
【关键词】：脂联素 亚型 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R593.22
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略词表10-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 文献综述13-19
• 2.1 类风湿关节炎与滑膜成纤维细胞13-14
• 2.2 脂联素14-19
• 2.2.1 脂联素及其亚型的发现14-15
• 2.2.2 脂联素受体15-16
• 2.2.3 RA患者的脂联素水平16-17
• 2.2.4 脂联素在RA中的作用17-19
• 第3章 材料与方法19-28
• 3.1 主要标本19-20
• 3.2 主要试剂20
• 3.3 主要仪器20-21
• 3.4 主要试剂的配置21
• 3.4.1 DMEM培养基的配置21
• 3.4.2 PBS的配置21
• 3.4.3 脂联素的溶解21
• 3.5 实验方法21-28
• 3.5.1 滑膜成纤维细胞的体外培养21-24
• 3.5.1.1 RASF和HLFS的原代培养22
• 3.5.1.2 RASF和HLFS的传代培养22-23
• 3.5.1.3 细胞冻存23
• 3.5.1.4 细胞复苏23-24
• 3.5.2 脂联素刺激RASF及HLFS24
• 3.5.3 酶联免疫吸附检测炎症因子24-27
• 3.5.3.1 MMP-10的检测25
• 3.5.3.2 PGE2的检测25-26
• 3.5.3.3 MMP-3、TNF-α及VEGF的检测26-27
• 3.5.4 统计学分析27-28
• 第4章 研究结果28-35
• 4.1 不同亚型脂联素对RASF的刺激作用28-31
• 4.1.1 HMW/MMW亚型脂联素对RASF的刺激作用28-29
• 4.1.2 Trimeric亚型脂联素对RASF的刺激作用29-30
• 4.1.3 Native脂联素对RASF的刺激作用30-31
• 4.2 不同浓度脂联素对RASF的刺激作用31-35
• 第5章 讨论35-38
• 第6章 结论38-39
• 第7章 本研究的创新之处39-40
• 参考文献40-54
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果54-55
• 致谢55

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 奚正德,李宁丽,张雁云,张冬青,臧敬五;滑膜成纤维细胞在关节炎发病中的作用[J];自然杂志;2004年04期

2 肖楚吟;潘云峰;郭兴华;蔡道章;;滑膜成纤维细胞的原代培养及生物特性[J];中国医学工程;2010年02期

3 丁娟;王志军;董晓薇;张淑雅;芦晓红;赵薇;;RA滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定[J];现代生物医学进展;2012年36期

4 周振华;徐卫东;吴岳嵩;;滑膜成纤维细胞与类风湿性关节炎相关研究的进展[J];中华关节外科杂志(电子版);2008年06期

5 柏干苹;周丽娜;贺伟峰;罗高兴;陈烯伟;易绍萱;胡晓红;石东文;陈光兴;方勇飞;吴军;;人骨关节炎滑膜成纤维细胞差异蛋白质谱初步分析[J];第三军医大学学报;2006年11期

6 柯庆喜;张志伟;赵付前;何玲鸽;陈章权;;肿瘤坏死因子-α对人滑膜成纤维细胞白细胞介素-37表达的影响[J];实用医学杂志;2013年05期

7 柏干苹;周丽娜;贺伟峰;罗高兴;陈烯伟;陈光兴;胡晓红;石东文;方勇飞;吴军;;S100A4,A10在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中的表达及意义[J];第四军医大学学报;2008年07期

8 侯亚楠;郭礼和;;滑膜成纤维细胞在类风湿性关节炎中的作用[J];细胞生物学杂志;2009年02期

9 姜林娣;王汉洲;郭津生;赵凤娣;薛如意;王吉耀;;RNA干扰技术抑制类风湿关节炎成纤维细胞COX-2合成[J];复旦学报(医学版);2007年02期

10 柏干苹;周丽娜;贺伟峰;罗高兴;陈烯伟;陈光兴;胡晓红;石东文;方勇飞;吴军;;类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞的差异蛋白质谱分析[J];第三军医大学学报;2008年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 蔡恒星;李颖杰;龙星;;不同浓度透明质酸对滑膜成纤维细胞粘附和增殖的影响[A];第八届全国颞下颌关节病学及（牙合）学大会论文汇编[C];2011年

2 聂英坤;于慧敏;张凤山;;紫草素对RA滑膜成纤维细胞COX-2表达的影响[A];全国第八届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2010年

3 贾俊峰;朱平;;滑膜成纤维细胞骨侵蚀体外培养体系的建立及应用[A];第17次全国风湿病学学术会议论文集[C];2012年

4 聂英坤;于慧敏;王振宇;;紫草素对RA滑膜成纤维细胞COX-2表达的影响[A];全国第十一届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2013年

5 吴振彪;朱平;卢宁;史战国;樊春梅;王彦宏;;类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞与单核细胞混合培养后基质金属蛋白酶合成能力[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年

6 舒强;李兴福;侯怀水;李栋;刘花香;;艾拉莫德对关节炎滑膜成纤维细胞特性的影响[A];全国自身免疫性疾病专题研讨会暨第十一次全国风湿病学学术年会论文汇编[C];2006年

7 张丽君;李博;谢燕;张春容;何伟珍;徐珊;叶志中;庄俊汉;;IL-1β对滑膜成纤维细胞炎症因子表达的影响[A];2009中国中西医结合系统性红斑狼疮研究学术会议资料汇编[C];2009年

8 李茹;张晓苹;王世瑶;穆荣;栗占国;;miR-146a对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞的抑制作用研究[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年

9 赵文君;崔爽爽;邢国胜;于顺禄;;类风湿关节炎滑膜成纤维细胞对T淋巴细胞生物学行为的干预作用[A];第十九届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2012年

10 郑一宁;梅轶芳;李宏颖;魏雪敏;韩玉艳;于惠铭;张志毅;;三氧化二砷调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞促血管生成作用的分子机制[A];第17次全国风湿病学学术会议论文集[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 张艳君;交叉韧带损伤后滑膜成纤维细胞中赖氨酰氧化酶和基质金属蛋白酶表达的研究[D];重庆大学;2013年

2 姜林娣;RNA干扰抑制COX-2合成以及对类风湿关节炎滑成纤维细胞生物学活性的影响研究[D];复旦大学;2006年

3 王建光;类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞的比较蛋白质组学研究[D];第二军医大学;2011年

4 张婷;p53在滑膜成纤维细胞炎症和增生中的作用[D];中国协和医科大学;2008年

5 柏干苹;正常人与关节炎患者血浆、滑膜细胞的差异蛋白质组分析[D];第三军医大学;2006年

6 窦鹏程;四种药物对骨关节炎滑膜成纤维细胞分泌IL-1β、MMP-13、PGE2的影响[D];中南大学;2012年

7 朱宝玉;滑膜成纤维细胞中促炎因子IL-6、VEGF影响骨关节炎病情进展的实验研究[D];中南大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李炳彤;脂联素亚型及浓度对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞促炎作用的影响[D];吉林大学;2016年

2 赵晓峰;三水白虎汤抑制滑膜成纤维细胞迁移的体外研究[D];南方医科大学;2015年

3 许永权;骨性关节炎相关基因MCF2L与滑膜成纤维细胞凋亡及炎症反应的关系研究[D];中南大学;2014年

4 陈岩;HMGB1-LPS复合物促进滑膜成纤维细胞向类风湿关节炎滑膜成纤维细胞表型的转变[D];第二军医大学;2013年

5 唐福兴;TLR4/NF-κB信号通路对人膝骨关节炎滑膜成纤维细胞骨桥蛋白表达的影响[D];桂林医学院;2014年

6 王菁;C反应蛋白在类风湿关节炎发病中的作用机制[D];安徽医科大学;2015年

7 贺t$雯;HMGB1与LPS协同激活类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞产生基质金属蛋白酶的分子机制[D];第二军医大学;2011年

8 孔静静;TLR4对脂多糖诱导的大鼠颞下颌关节滑膜成纤维细胞分泌IL-1β、TNF-α的影响[D];山东大学;2015年

9 蔺娜;脂联素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞迁移及侵袭特性影响的研究[D];南京医科大学;2015年

10 陶可;IL-6R抗体调节PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMPs和血管化因子mRNA表达的实验研究[D];汕头大学;2011年

，

本文编号：943793