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Wnt信号通路中AXIN1上调蛋白AXUD1的克隆表达及其功能 研究

发布时间:2024-03-09 17:15
  Axud1(Axin1 up-regulated)基因是近年来在人类结肠癌细胞中鉴定出的受Wnt信号通路中的轴蛋白AXIN1上调表达的基因。该基因含有五个外显子,其编码产物为分子量63kD的细胞核内蛋白,该基因在肺癌、肾癌、肝癌和结肠癌中的表达较相应的正常组织均明显降低。通过GENK BANK上BLAST的搜索结果表明,AXUD1与TGF-β诱导的凋亡蛋白2、12(TAIP-2、TAIP-12有较高的同源性,提示axud1可能是一个具有肿瘤抑制功能的基因,并可能在TGF-β诱导的细胞凋亡中起着重要作用。 为了进一步研究AXUD1在人类肿瘤发生中的作用及axud1基因的表达状况与TGF-β介导的信号通路的关系,本实验研究分为三个部分:(1)axud1基因cDNA全长编码区的克隆和HA表位标记的axud1基因表达载体的构建;(2)探讨肝癌细胞HepG2和肺腺癌SPC-A1细胞中TGF-β1诱导的axud1基因表达的时间、剂量效应以及诱导表达的可能机理,并研究AXUD1的过表达对细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达的影响;(3)axud1原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达。 ...

【文章页数】:78 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

图1Wnt信号转导通路

图1Wnt信号转导通路

月IJ舀糖蛋白介导的Wnt信号通路在许多细胞过程,如细胞迁移、形态发生及肿瘤的发生等过程中起着极为重要的类,Wnt作用于细胞表面受体Fri22led,继而激lled家族蛋白(Dsh),包括Dvl一1,Dvl一2,和Dvl一3合成酶激酶3p(GSK一3p)的效应,从而稳定p一cat....


图2Smad介导的TGF一p信号转导通路

图2Smad介导的TGF一p信号转导通路

第一军医大学博士学位论文mad,R一Smad),包括Smadl、SmadZ、Smad3、SmMad,这一类Smad在特定的TGF一p超家族成员介挥作用,如:BMPZ/4通过Smadl和Smads,TGF一和Smad3;(2)通用Smad(CommonSmad,C一Sm的Medea....


图1一4A:重组质粒pGEM一T/axudl用SP6引物测序结果

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图2一4;FCM测定HepGZ/peDNA3.1和HepGZ/ha一axudl两组细胞中DNA

图2一4;FCM测定HepGZ/peDNA3.1和HepGZ/ha一axudl两组细胞中DNA

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本文编号:3923674

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