IGF-I明胶微球对骨髓基质干细胞增殖分化作用实验性研究

发布时间：2017-10-16 20:11

  本文关键词：IGF-I明胶微球对骨髓基质干细胞增殖分化作用实验性研究

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【摘要】：目的：制备胰岛素样生长因子-I明胶微球(IGF-I-GMs)，观察其一般性质、体外释药性及对兔骨髓基质干细胞（BMSCs）增殖和分化效应。 方法：采用乳化交联法制备IGF-I-GMs，观察其性质；ELISA试剂盒测定IGF-I的含量，计算微球包封率、载药率以及体外释药性。体外分离培养兔BMSCs，四唑盐比色法（MTT）检测IGF-I和IGF-I-GMs对BMSCs增殖的影响。用PNPP偶氮法检测碱性磷酸酶活性，反应IGF-I和IGF-I-GMs对BMSCs向成骨细胞定向分化影响。 结果：(1)所制备的微球表面光滑圆整、均匀分布，微球载药量和包封率高，，体外药物缓释作用好；(2)IGF-I和IGF-I-GMs均促进BMSCs增殖，且IGF-I-GMs效果更加显著；（3）IGF-I和IGF-I-GMs均促进BMSCs向成骨细胞分化，且IGF-I-GMs效果更加显著。结论： IGF-I-GMs在7天内对IGF-I有良好的缓慢释放作用；BMSCs形态和活性良好；IGF-I-GMs与BMSCs有良好的生物相容性，且促进BMSCs增殖及成骨作用均明显优于单独使用IGF-I。
【关键词】：胰岛素样生长因子-I 明胶微球 骨髓基质干细胞 增殖 分化
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R783.1
【目录】：

• 中文摘要7-8
• Abstract8-9
• 中英文对照缩写表9-10
• 前言10-13
• 实验一 IGF-I-GMs 的制备及其性质检测13-23
• 1.材料13
• 1.1 主要仪器13
• 1.2 主要试剂13
• 2.方法13-17
• 2.1 明胶微球制备和筛选13-14
• 2.2 明胶微球干燥消毒14
• 2.3 IGF-I-GMs 的制备及粒径分析14-15
• 2.4 检测 IGF-I-GMs 的体外释药特性15-16
• 2.5 IGF-I-GMs 的载药率及包封率的测定16
• 2.6 .IGF-I-GMs 的体外降解特性16-17
• 2.7 统计学分析17
• 3.实验结果17-20
• 3.1 微球的形态特征17
• 3.2. IGF-I-GMs 体外释药特性17-18
• 3.3. IGF-I-GMs 的体外降解特性18-20
• 4.讨论20-23
• 实验二 IGF-I-GMs 对 BMSCs 增殖分化的影响23-34
• 1.材料23-24
• 1.1 主要仪器23
• 1.2 主要试剂23-24
• 2.方法24-26
• 2.1 所需试剂的配制24
• 2.2. 兔 BMSCs 的分离与培养24-25
• 2.3 观察 BMSCs 形态及绘制生长曲线25
• 2.4. IGF-I 和 IGF-I-GMs 对 BMSCs 增殖分化的影响25-26
• 2.5 统计学分析26
• 3 结果26-30
• 3.1. BMSCs 的形态学观察26-28
• 3.2 BMSCs 的生长曲线28
• 3.3. MTT 法检测 BMSCs 的增殖28
• 3.4. PNPP 偶氮法检测碱性磷酸酶活性28-29
• 3.5. IGF-I 和 IGF-I-GMs 对 BMSCs 增殖分化的影响29-30
• 4 讨论30-34
• 结论34-35
• 参考文献35-39
• 综述39-50
• 摘要39
• Abstract39-40
• 1.组织工程学和骨组织工程40
• 2.种子细胞40-42
• 2.1 骨髓基质干细胞40-41
• 2.2 胚胎干细胞41-42
• 3.骨组织工程相关生长因子42-44
• 3.1 骨形态发生蛋白(BMP)42
• 3.2 血管内皮生长因子(VEGF)42-43
• 3.3 碱性成纤维细胞生成因子(bFGF)43
• 3.4 转化生长因子-β(TGF-β)43
• 3.5 胰岛素样生长因子(IGF)43-44
• 4.生长因子缓释微球44-46
• 4.1 多聚体44
• 4.2 壳聚糖44-45
• 4.3 明胶45-46
• 参考文献46-50
• 个人简介50-51
• 致谢51

【参考文献】

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本文编号：1044652