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KLD-12多肽/rhBMP-2纳米纤维凝胶诱导BMSCs成骨活性的实验研究

发布时间:2023-10-03 21:21
  目的:利用KLD-12多肽缓释的特性,复合合适剂量的重组人骨形态发生蛋白-2(Recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2),构建具有生物活性的组织工程支架材料KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶复合骨髓间充质干细胞(BMSCs),探讨该纳米纤维凝胶材料诱导BMSCs成骨活性的实验研究。方法:取3月龄(雌雄不限)新西兰大白兔骨髓,采用密度梯度法分离并培养BMSCs。取第3代BMSCs分别采用适合浓度的rhBMP-2∕KLD-12多肽体外三维培养(实验组)和KLD-12多肽培养(对照组),诱导BMSCs成骨。培养2、5、7、10、14d细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8)法检测检测两组凝胶内细胞增殖活性;培养7、14d钙黄绿素(Calcein-AM)/碘化丙啶(PI)荧光染色观察实验组与对照组凝胶内活细胞与死细胞数量,计算活细胞比率;3、7、10、14、21 d检测两组细胞培养基中碱性磷酸酶(ALP)及骨钙蛋白(Osteocalcin,OCN)含量;培养14 d两组细胞行Ⅰ型胶原免疫荧光染色观察,实时荧...

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