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miR-363对骨肉瘤细胞的调控作用及其分子机制研究

发布时间:2024-03-24 04:55
  目的:骨肉瘤(osteosarcoma,OS),起源于间叶组织,是儿童和青少年中最多见的原发性恶性骨肿瘤,约占所有原发恶性骨肿瘤的15%-23%。虽然手术结合新辅助化疗的治疗方式显著改善了骨肉瘤患者的预后,但是,在过去30年里,病人的存活率并没有显著的提升,特别对于产生耐药性的患者或在诊断时就己发生转移的患者,临床治疗效果仍然欠佳,存活率仍然小于30%。因此,探讨骨肉瘤发生、发展的分子机制,并为骨肉瘤的治疗、诊断和预后寻找新的生物标志物是一项重要和迫切的任务。微小RNA(miRNA)是重要的转录后调控因子,这些非编码小RNAs与特异性同源序列靶转录物的3’-非翻译区(3’-UTR)相结合,通常会导致靶基因的翻译抑制和基因的沉默。PDZD2是促进胰岛瘤细胞增殖的多PDZ结构域蛋白,己明确其在前列腺肿瘤发生过程中上调,但是PDZD2在骨肉瘤中的功能仍不清楚。miRNA的失调可以通过其对靶基因的调节促进肿瘤的发生,增殖和转移。本研究调查了 miR-363和PDZD2在骨肉瘤细胞MG-63中的功能,以及miR-363和PDZD2的相互作用关系,以探究miR-363对骨肉瘤细胞的调控作用及其分子...

【文章页数】:80 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

图2?miR-363与PDZD2的表达呈负调控关系??

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通过对8对骨肉瘤组织和瘤旁组织的qPCR检测并对比后发现骨肉瘤组织??中的miR-363呈现低表达,而PDZD2的表达则升高(图1?),且二者表达呈现负??调控的趋势(图2)。结果有统计学差异。??14??


图3不同细胞株中miR-363的表达水平??Fig.?3?Expression?level?of?miR-363?in?different?cell?lines??

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通过对成骨细胞株hFOBl.19和骨肉瘤细胞株MG-63、HOS和Saos-2的??qPCR检测,发现miR-363在骨肉瘤细胞株中呈现低表达状态,其中MG-63细??胞的miR-363低表达与其他骨肉瘤细胞相比较显著(


图4设计合成的miR-363NC.mimics序列

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图5转染后细胞中miR-363的表达??Fig.5?Expression?of?miR-363?in?cells?after?transfection??

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3.3通过转染使骨肉瘤细胞中miR-363过表达??首先设计合成miR-363NC、mimics序列(图4),转染骨肉瘤细胞MG-63;??然后用qPCR检测转染的效果,如图5所示,相比MG-63+NC组,MG-63+mimics??组中的miR-363含量显著增高,表明转染可提....



本文编号:3937000

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