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催化合成西格列汀的转氨酶基因的克隆表达

发布时间:2019-05-29 04:45
【摘要】:将可催化合成西格列汀的转氨酶基因克隆到表达载体p GEX-6p-1上,并转入大肠杆菌E.coli中表达,获得高效表达重组转氨酶的菌株。分别考察基因在不同大肠杆菌[E.coli W3110、E.coli BL21(DE3)、E.coli Rosetta(DE3)和E.coli Rosetta-gami2(DE3)]中的表达情况,结果显示,转氨酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量较高,而且多为可溶性表达。所得重组转氨酶(粗酶)比活力也较高,为0.32 u/mg。
[Abstract]:The transaminase gene which can catalyze the synthesis of sieglitine was cloned into the expression vector p GEX-6p-1 and transformed into E. coli E.coli to obtain the strain which highly expressed the recombinant transaminase. The expression of transaminase in different E. coli [E.coli W3110, E. coli BL21 (DE3), E.coli Rosetta (DE3) and E.coli Rosetta-gami2 (DE3)] was investigated respectively. the results showed that the expression of transaminase in E. coli BL21 (DE3) was higher. And most of them were soluble expression. The specific activity of recombinant transaminase (crude enzyme) was also higher, which was 0.32 u 路mg 路L ~ (- 1) 路L ~ (- 1).
【作者单位】: 中国医药工业研究总院上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室;正大天晴药业股份有限公司;
【分类号】:R914.5;Q78

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