游泳训练对水浸束缚应激大鼠免疫功能及胃肠粘膜细胞凋亡影响的研究

发布时间：2017-09-14 07:32

  本文关键词：游泳训练对水浸束缚应激大鼠免疫功能及胃肠粘膜细胞凋亡影响的研究

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【摘要】： 应激(stress)是指机体受到强烈刺激后发生的,以交感神经-肾上腺髓质和垂体-肾上腺皮质功能增强为主要特点的非特异性反应。任何躯体或心理的刺激,只要达到一定的强度,除了引起与刺激因素直接相关的特异性变化外,也可引起一组与刺激因素的性质无直接关系的全身性非特异性反应。强烈的身心应激严重影响人类的身心健康,可导致情感行为异常、免疫功能低下,神经内分泌功能异常等。因此,应激与心身疾病关系的研究在传统生物医学模式向生物-心理-社会医学模式转变的今天已成为医学研究领域的一个重要课题,并受到军事医学的广泛关注。 研究表明,机体受应激影响最严重的两大系统分别是消化系统和免疫系统。一般认为,严重应激反应主要导致机体的细胞免疫功能降低,体液免疫功能增强,形成Thl向Th2漂移。胃肠道不仅是消化、吸收营养物质的场所,而且是体内最大的免疫器官。胃肠道粘膜的免疫屏障功能被各种因素削弱时,外来微生物如细菌、病毒和寄生虫等的入侵,可造成消化道或全身性疾病.胃肠道分泌的sIgA是相对的非炎症物质,其水平的高低决定了机体胃肠道免疫水平的强弱。而自细胞凋亡概念提出后,应激后胃肠粘膜是否存在凋亡?越来越引起了学者们的关注。 现代战争具有高技术、高强度、高杀伤力的特点,在现代战场环境下,参战人员势必受到强烈的心理和生理刺激,产生强烈的应激反应。应激常常累及胃肠道,可引起胃肠道消化、吸收、分泌、运动、免疫、肠粘膜屏障等等功能障碍,其中应激性溃疡、肠粘膜屏障损害和胃肠动力障碍是各种应激引起的重要的病理结果,是伤病员救治的重点和难点。因此,研究应激对机体免疫功能和胃肠粘膜完整性的影响及防治可以深入揭示其发生机制,不仅能提高野战医学救治水平,还可为平时防治应激造成的心理生理损害提供理论指导。 本课题拟以大鼠为实验对象,制备稳定成熟的大鼠应激性胃肠粘膜损害模型——水浸-束缚应激(water-immersion restraint stress ,WRS)模型,探讨应激状态对大鼠整体免疫功能(包括血清TNF-α、IL-6、IL-2)、胃、肠粘膜免疫功能——肠腔内分泌型免疫球蛋白(sIgA)、血清皮质醇,Tunel法检测胃、肠上皮细胞凋亡率,免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白表达。同时,设置适当游泳训练组大鼠,比较预先给予合适的心理和生理训练(游泳训练)对提高大鼠胃肠道免疫能力和降低胃肠上皮细胞凋亡的作用,为进一步深入研究大鼠应激反应过程中胃肠功能的变化规律和保护措施的寻找奠定基础,以期在此基础逐步提出现代战争条件下常见的创伤应激后胃肠功能紊乱的防治预案。 【材料与方法】 健康雄性Wistar大鼠48只,经适应性环境后10天,随机分为3组,每组16只。A组:适当游泳训练+水浸束缚应激;B组:适当游泳训练组;C组:无游泳训练+水浸束缚应激。给予A、B两组大鼠在平静水中自由游泳30min,2次/日,连续5天为适当游泳训练。结束游泳训练后,所有大鼠均经禁食24h,禁水1h后,A、C组大鼠在轻度乙醚吸入麻醉下,水浸时间1.5h,制作成为水浸-束缚应激(WRS)模型。 结束水浸-束缚应激试验后,处死大鼠,立即从腹腔主动脉处各取血2ml,低温分离血清,采用ELISA法检测大鼠血清TNF-α和IL-6水平,采用放射免疫法检测大鼠血清IL- 2和皮质酮水平;生化法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;洗涤法获取结肠肠液检测sIgA含量,采用ELISA法进行检测。 采用Tunel法原位检测大鼠胃、肠粘膜上皮细胞凋亡指数,免疫组织化学法检测凋亡相关基因Bax ,Bcl-2表达。 【结果】 1.三组实验大鼠共48只,实验结束后均存活,打开腹腔见均无腹水,腹膜、胃壁、肠壁肉眼观色鲜红、无明显坏死、无淤血扩张;A、B组两组大鼠胃内均未见出血和溃疡灶,C组16只中,有4只发现胃内点状溃疡出血、少量血凝块。三组实验大鼠中分别有3、1、6只见肠管苍白、积气、少量伴有积血; 2.A组(适当游泳训练+水浸束缚应激)和B组(适当游泳训练组)大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-2水平明显高于C组(无游泳训练+水浸束缚应激)大鼠(P0.05);而血清皮质醇水平三组间无显著性差异(P0.05); 3.A组(适当游泳训练+水浸束缚应激)肠液中sIgA为36.3±3.6mg/L,B组(适当游泳训练组)大鼠肠液中sIgA为39.1±4.0mg/L,均明显高于C组(无游泳训练+水浸束缚应激)大鼠肠液中sIgA水平(27.1±2.8mg/L)(P0.05); 4.A组(适当游泳训练+水浸束缚应激)和B组(适当游泳训练组)大鼠血清SODA水平明显高于C组(无游泳训练+水浸束缚应激)大鼠(P0.05),而血清MDA水平则低于C组(P0.05); 5.三组大鼠胃、肠粘膜均可见程度不等的急性炎症变化,部分标本可见肠壁轻度变薄。腺体无明显萎缩; 6.三组大鼠胃、肠粘膜均可见程度不等的凋亡细胞表达。免疫组化检测Bcl-2、Bax阳性细胞表达示,阳性信号位于细胞浆和核膜,三组大鼠胃、肠粘膜阳性表达率存在差异。统计C组大鼠Tunel凋亡指数AI和Bcl-2、Bax阳性细胞表达率与A、B两组大鼠比较存在显著性差异(P0.05),AI与Bcl-2表达A值呈正相关,而与Bax表达A值呈负相关。 【结论】 适当游泳训练能提高应激大鼠整体和胃肠道免疫功能,能提高机体清除自由基功能,机体通过Bcl-2上调和Bax下调对抗应激条件下凋亡的发生和发展,适当的心理和生理训练可以降低机体应激时细胞凋亡。
【关键词】：水浸束缚应激 游泳训练 免疫 自由基 细胞凋亡
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R82
【目录】：

• 缩略词表6-7
• 中文摘要7-11
• 英文摘要11-15
• 前言15-17
• 材料与方法17-25
• 结果25-33
• 讨论33-46
• 小结46-47
• 参考文献47-57
• 综述57-66
• 致谢66

【参考文献】

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本文编号：848721