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左旋箭毒碱、异粒枝碱和轮环藤碱对巨噬细胞过度活化的抑制作用及机制研究

发布时间:2023-12-09 17:29
  外周炎症反应是机体对侵入的细菌、病毒、寄生虫等进行的一种防御性反应。巨噬细胞是机体免疫系统的重要组成部分,具有多种免疫功能,是炎性反应中的主要调节细胞,与肿瘤、外周炎症疾病及代谢疾病等相关病症有着密切的关系。当宿主发生病原体感染后,一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)等炎症因子释放量显著上升,增加巨噬细胞表面分子,诱导细胞免疫,杀灭病原微生物,在有效清除病原体方面起关键作用。但巨噬细胞的过度活化,会导致炎症因子的大量释放,引起周围组织损伤,并与动脉粥样硬化等疾病的发生具有重要关系。抑制巨噬细胞过度活化对抑制外周炎症反应有重要意义。本文考察了左旋箭毒碱、轮环藤碱、异粒枝碱三种双苄基异喹啉类生物碱(BBI)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞过度活化的抑制作用及机制。首先,培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察三种BBI(0.1-30μmol/L)单独或与LPS(1μg/ml)联合应用对巨噬细胞存活率的作用,以排除药物毒性作用造成的影响。结果表明,三种生物碱对LPS活化的巨噬细胞...

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
前言
    0.1 巨噬细胞(Macrophage, Mac)
    0.2 巨噬细胞过度活化在相关病症中的作用
        0.2.1 巨噬细胞与肿瘤
        0.2.2 巨噬细胞与动脉粥样硬化
        0.2.3 巨噬细胞与高血压
        0.2.4 巨噬细胞在其它相关疾病中的作用
    0.3 LPS激活的巨噬细胞NO及炎症因子释放
    0.4 LPS激活的巨噬细胞[Ca2+]i变化
    0.5 巨噬细胞激活与活性氧自由基产生
    0.6 双苄基异喹啉类生物碱(BBI)的化学结构、种类及重要药理作用
    0.7 左旋箭毒碱、轮环藤碱、异粒枝碱的药理作用研究进展
        0.7.1 左旋箭毒碱((-)-Curine)
        0.7.2 轮环藤碱(Cycleanine)
        0.7.3 异粒枝碱(Isochondodendrine)
第1章 三种双苄基异喹啉类生物碱抑制巨噬细胞过度活化的药效学研究
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验用细胞系
        1.1.2 实验药品与试剂
        1.1.3 实验仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养和药物配制
        1.2.2 细胞存活率的测定--MTT法检测
        1.2.3 亚硝酸盐含量的测定--Griess法检测
        1.2.4 ELISA法考察RAW264.7 细胞内IL-1β、TNF-α、IL-6 释放的变化
        1.2.5 统计学方法
    1.3 实验结果
        1.3.1 LPS激活RAW264.7 巨噬细胞NO升高模型的建立
        1.3.2 三种双苄基异喹啉类生物碱对RAW264.7 巨噬细胞存活率的影响
        1.3.3 三种双苄基异喹啉类生物碱对RAW264.7 细胞NO释放的影响
        1.3.4 三种双苄基异喹啉类生物碱对LPS活化的RAW264.7 细胞IL-1β释放的影响
        1.3.5 三种双苄基异喹啉类生物碱对LPS活化的RAW264.7 细胞IL-6 释放的影响
        1.3.6 三种双苄基异喹啉类生物碱对LPS活化的RAW264.7 细胞TNF-α释放的影响
    1.4 分析与讨论
    1.5 小结
第2章 三种双苄基异喹啉类生物碱抑制巨噬细胞过度活化的机制研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验用细胞系
        2.1.2 实验药品与试剂
        2.1.3 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 Western blot analysis法检测巨噬细胞内iNOS蛋白表达
        2.2.2 流式细胞仪检测胞浆内游离钙离子
        2.2.3 NO清除作用(Nitric oxide-scavenging effect)的测定
        2.2.4 自由基清除作用
    2.3 实验结果
        2.3.1 三种BBI对LPS活化的巨噬细胞内iNOS蛋白表达的影响
        2.3.2 三种BBI对LPS过度活化的巨噬细胞内[Ca2+]i水平的影响
        2.3.3 BBI的NO清除作用
        2.3.4 三种BBI的自由基清除作用
    2.4 分析与讨论
    2.5 小结
结论
致谢
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况



本文编号:3871908

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