高三尖杉酯碱对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响及机制研究

发布时间：2024-05-24 19:46

　　目的探究高三尖杉酯碱(homoharringtonine, HHT)对人黑色素瘤A375增殖的影响及可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测HHT对A375细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法观察染色质凝集情况;细胞克隆形成实验检测HHT对A375细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术(Flow cytometry, FCM)检测HHT对A375细胞凋亡和周期影响;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase 3、Cleaved-PARP、CyclinB1和CDK1蛋白的表达情况。结果 CCK-8结果显示,随着药物的剂量(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μmol·L^-1)和作用时间(24、48、72 h)增加,HHT对A375细胞的抑制作用逐渐增强;Hoechst 33258染色和FCM结果显示,HHT可使A375细胞染色质呈凋亡形态改变,促进细胞凋亡,将A375的细胞周期阻滞于G₂/M期;克隆形成实验显示,HTT可以抑制A375细胞的克隆形成能力;Western blot结果表明HHT可...

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【文章目录】：
1 材料
    1.1 细胞株
    1.2 药物与试剂
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 细胞培养
    2.2 药物配置
    2.3 CCK-8法检测A375细胞活力
    2.4 Hoechst 33258 染色实验
    2.5 细胞克隆形成实验
    2.6 FCM检测细胞凋亡
    2.7 FCM检测细胞周期
    2.8 免疫印迹实验(Western blot)检测相关蛋白的表达
    2.9 统计学方法
3 结果
    3.1 HHT抑制A375细胞的增殖
    3.2 HHT促进A375细胞发生凋亡
    3.3 HHT诱导A375细胞周期阻滞于G2/M期
    3.4 HHT降低A375细胞的克隆形成能力
    3.5 Western blot检测A375细胞凋亡相关蛋白的表达
    3.6 Western blot检测A375细胞周期相关蛋白的表达
4 讨论



本文编号：3981158