海洋石油降解菌的分离鉴定及其在海洋石油污染生物修复中的应用研究

发布时间：2025-06-06 05:01

　　由于全球性广泛的石油生产、运输、使用和处置,在许多环境特别是海洋环境中,石油污染已经成为一个普遍而严重的问题。目前,我国沿海地区海水含油量已超过国家规定的海水水质标准2～8倍。本文以原油或柴油为唯一碳源从厦门近海表层海水样品中通过富集筛选得到了2组降解菌群。从柴油富集物中分离得到了2株细菌,经16SrDNA鉴定分别属于假单胞菌属(Pseudomonas pseudoalcaligenes,97%)和食烷菌属(Alcanivorax dieselolei,99%)。从原油富集物中分离得到了7株细菌,经16SrDNA鉴定,分别属于不动杆菌属(Acinetobacter radioresistens,99%)、生丝单孢菌属(Hyphomonas johnsonii,99%)、食烷菌属(Alcanivorax borkumensis,99%)、根瘤菌属(Mesorhizobium loti,96%)、赤细菌属(Erythrobacter flavus,93.58%)、玫瑰杆菌属(Roseobacter gallaeciensis, 95.81%)和希瓦氏菌属(Shewanella aquimar...

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 海洋石油污染的生物修复
        1.1.1 海洋石油污染的现状与危害
        1.1.2 石油在海洋环境中的降解途径及归宿
        1.1.3 降解石油的微生物
        1.1.4 影响海洋石油烃微生物降解的关键因素
        1.1.5 生物修复在海洋石油污染治理中的应用
    1.2 细菌的鉴定分类
        1.2.1 脂肪酸分析
        1.2.2 醌在细菌分类中的作用
        1.2.3 DNA 碱基组成（G+C MOL%）分析在分类中的应用
        1.2.4 DNA-DNA 相关性
        1.2.5 RRNA 序列分析
    1.3 本研究的目的及意义
2 材料与方法
    2.1 材料
    2.2 基本方法
    2.3 海洋原油降解菌的富集、分离和鉴定
        2.3.1 培养基
        2.3.2 原油降解菌的富集、筛选
        2.3.3 PCR-DGGE 确定混合菌群中的优势菌
        2.3.4 16SRDNA 的鉴定与系统发育树的构建
    2.4 原油降解细菌新种的分类
        2.4.1 表型分析
        2.4.2 细菌叶绿素A 及类胡萝卜素的检测
        2.4.3 反相高效液相色谱法测定基因组DNA 中的G+CMOL%含量
        2.4.4 气相色谱-质谱法测定细菌中脂肪酸
        2.4.5 BIOLOG 细菌鉴定法
    2.5 柴油及原油降解菌群的构建与优化
        2.5.1 单菌及混合菌群降解能力的测定
        2.5.2 柴油混合菌群结构变化的监测
        2.5.3 原油混合菌群在不同底物中的菌群结构变化
    2.6 户外水池模拟沙滩原油污染修复实验
3 结果与讨论
    3.1 海洋石油及柴油降解菌的富集、分离和鉴定
        3.1.1 结果与分析
        3.1.2 讨论
    3.2 两种原油降解菌新种芳烃赤细菌（ERYTHROBACTER AROMATIPHILUS）及厦门玫瑰杆菌（ROSEOBACTER XIAMENGENSIS）的鉴定
        3.2.1 结果与分析
        3.2.2 讨论
    3.3 柴油及原油降解菌群的构建
        3.3.1 结果与分析
        3.3.2 混合菌群的优化
        3.3.3 讨论
    3.4 模拟沙滩原油污染生物修复实验
        3.4.1 结果与分析
        3.4.2 讨论
小结和展望
参考文献
致谢



本文编号：4049829