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关岭牛PPAP2B基因mRNA在不同组织中的表达分析

发布时间:2025-05-05 01:27
   为了研究关岭牛PPAP2B基因mRNA在不同组织中的表达水平及相关功能,试验以关岭牛为实验动物,分别提取心脏、肝脏、小肠、脂肪、大腿肌、背最长肌组织的总RNA,以不同组织的总RNA为模板,逆转录合成cDNA,以GAPDH基因作为内参,应用实时荧光定量PCR技术检测PPAP2B基因mRNA在不同组织中的相对表达量。结果:关岭牛PPAP2B基因mRNA在脂肪中表达量最高,在其他组织中表达量很少甚至几乎不表达。结论:PPAP2B基因可能在牛的脂肪沉积过程中发挥作用。

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【部分图文】:

图1 总RNA的2100分析仪检测结果

图1 总RNA的2100分析仪检测结果

由图1可见:各组织中提取的RNA经1%琼脂糖凝胶电泳检测,18S和28S条带清晰,无明显扩散现象。经超微量紫外分光光度计检测,RNA浓度适中,质量较好,可用于下一步实验。2.2实时荧光定量PCR产物的特异分析


图2 关岭牛PPAP2 B基因q RT-PCR溶解曲线和扩增曲线

图2 关岭牛PPAP2 B基因q RT-PCR溶解曲线和扩增曲线

通过实时荧光定量PCR反应得到目的基因PPAP2B和内参基因GAPDH的溶解曲线及扩增曲线(见图2、图3)。二者的扩增曲线拐点清晰,斜率较高,均呈S型,表明扩增效率较高;溶解曲线均为光滑的单峰曲线,Tm温度附近无明显杂峰,表明引物特异性和重复性好,无引物二聚体出现,符合试验的质....


图3 关岭牛GHPDA基因q RT-PCR溶解曲线和扩增曲线

图3 关岭牛GHPDA基因q RT-PCR溶解曲线和扩增曲线

图2关岭牛PPAP2B基因qRT-PCR溶解曲线和扩增曲线2.3PPAP2B基因mRNA在不同组织的相对表达量


图4 关岭牛PPAP2 B基因m RNA在不同组织中的相对表达量

图4 关岭牛PPAP2 B基因m RNA在不同组织中的相对表达量

由图4可见:关岭牛PPAP2B基因mRNA在脂肪组织中的相对表达量高达34.4556,显著高于其他组织(P<0.05);其次为小肠、心脏、肝脏、大腿肌;在背最长肌组织中最低,只有0.0333。3结论



本文编号:4042903

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