姜黄素和5-氮杂胞苷对菊花DNA甲基化水平及基因表达的影响

发布时间：2025-05-13 00:18

　　菊花(Chrysanthemum×morifolium Ramat.)是菊科菊属,多年生草本植物,是世界著名的观赏植物之一。菊花分为夏菊、秋菊和冬菊(寒菊),但以秋菊为主,这种固定的花期与人们四季赏菊的需求不再相符,所以控制菊花花期的研究备受关注。传统技术上诱导菊花提前开花主要是通过调控光周期和改变环境温度来实现的,成本较高。因此寻找更加便捷有效的调控花期分子生物学方法,更具有广阔的前景和推广价值。目前通过DNA甲基化转移酶抑制剂处理调控植物花期的研究已取得了一些进展。为了促进菊花提前开花的方法更适合生产应用,本研究利用5-氮杂胞苷(5-Azacytidine)和姜黄素两种甲基化酶抑制剂来设置不同的处理方式来处理55个菊花品种(包括组培苗和菊花插穗),然后以处理材料的再生植株为研究对象,通过生长发育指标测定、液相色谱、MSAP、转录组测序和荧光定量PCR等方法,研究了5-zaz C和姜黄素对菊花DNA甲基化水平及花期基因表达的影响。主要结果如下:(1)使用姜黄素和5-azaC处理菊花,产生了丰富的表型变异材料。利用姜黄素和5-azaC处理组培品种30 d后,分别有7个菊花品种的株高、10...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
1 绪论
    1.1 植物成花研究进展
    1.2 光周期途径调控开花研究
    1.3 自主途径调控开花研究
    1.4 表观遗传学
    1.5 DNA甲基化
    1.6 开花时间调节中存在的表观遗传机制
    1.7 DNA甲基化的研究方法
    1.8 转录组测序-挖掘关键基因的高效手段
    1.9 研究的目的、意义以及主要内容
    1.10 本研究的技术路线
2 姜黄素和5aza-C对菊花生长表型的影响
    2.1 实验材料
    2.2 实验药品、试剂及配置
        2.2.1 实验药品
        2.2.2 实验试剂的配制
    2.3 实验方法
    2.4 结果与分析
        2.4.1 5-azaC对组培材料表型的影响
        2.4.2 姜黄素和5aza-C处理对菊花插穗表型的影响
    2.5 讨论
        2.5.1 姜黄素和5aza-C处理对菊花表型性状的影响
        2.5.2 姜黄素和5aza-C处理对菊花花期的影响
3 姜黄素和5-aza C对菊花DNA甲基化水平影响
    3.1 实验材料
    3.2 MSAP所需药品、试剂及配置
        3.2.1 实验药品
        3.2.2 实验试剂的配置
    3.3 实验方法
        3.3.1 MSAP实验方法
        3.3.2 HPLC实验方法
    3.4 结果与分析
        3.4.1 利用MSAP方法分析姜黄素和5-aza C处理对菊花DNA甲基化影响
        3.4.2 利用HPLC方法分析姜黄素和5-aza C对菊花DNA甲基化影响
    3.5 讨论
4 5-azaC处理材料的绝对定量转录组测序分析
    4.1 实验材料及处理方法
    4.2 转录组实验流程
        4.2.1 菊花叶片RNA的提取
        4.2.2 构建测序文库
        4.2.3 测序数据质量质控
        4.2.4 UID去重数据质控
        4.2.5 基因功能注释
        4.2.6 基因表达量分析
        4.2.7 差异表达基因分析
        4.2.8 测序结果的qPCR验证
    4.3 转录组数据分析
        4.3.1 测序数据质量控制
        4.3.2 UID去重数据质控
        4.3.3 Nr注释结果
        4.3.4 测序数据的均一性检测
        4.3.5 基因表达水平分析
        4.3.6 样品生物学重复相关性检测
        4.3.7 差异表达基因筛选
        4.3.8 差异表达聚类分析
        4.3.9 差异表达基因GO功能分类注释
        4.3.10 差异表达基因KEGG功能分类注释
        4.3.11 5-aza C处理菊花材料与对照组差异表达基因q RT-PCR结果验证
    4.4 讨论
        4.4.1 测序结果分析
        4.4.2 差异表达基因分析
        4.4.3 花期相关基因分析
5 结论
参考文献
致谢
附录 10个菊花品种处理后花期对比图



本文编号：4045448