芸薹根肿菌致病性及其生理小种分化的研究

发布时间：2025-06-21 03:47

　　十字花科作物根肿病也称根癌,是由芸薹根肿菌(Plasmodiaphora brassicae Woronin)侵染引起的世界性土传病害,在中国乃至全世界范围危害严重。目前生产上主要采用农业防治、化学防治和生物防治,但鉴于农业防治劳动强度大、周期长且容易造成土壤板结;化学药剂防治,容易造成农药残留；生物防治研究不太成熟且生防菌种类有限等种种因素导致整体防效并不理想。因此,在生产上培育具有根肿病抗性的十字花科品种是最根本最安全的途径。但当前我们对于根肿病抗性的遗传规律并不十分明确,培育出的抗病品种通常具有生理小种特异性,加之病原菌变异迅速,使得其抗性不能持久,所以,要想有效地防治根肿病,一方面必须加大抗性品种筛选力度,为抗病育种提供多来源的抗性资源,另一方面,还要进一步明确病原菌的致病机理,加强根肿菌的早期检测,从而开展根肿病的综合防治。本研究通过比较不同接种方法的发病情况,研究室内接种的适宜方法,利用正交试验探讨接种最优发病体系；以收集到的130多个芸薹属蔬菜品种为材料,通过插入法进行抗病性鉴定,筛选抗病品种；利用光学显微镜鉴定和PCR检测的方法检测根肿组织中存在的根肿菌,并利用ECD系统...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
缩写词(Abbreviation)
前言
1 文献综述：十字花科植物根肿病的致病性和遗传多样性研究进展
    1.1 十字花科植物根肿病及抗病育种研究进展
        1.1.1 根肿病的发生与危害
        1.1.2 根肿病的症状识别
        1.1.3 芸薹根肿菌的生物学特性
        1.1.4 根肿病的寄主及病原菌的侵染方式
        1.1.5 芸薹根肿菌的检测
            1.1.5.1 植株诱导法
            1.1.5.2 荧光显微镜观察法
            1.1.5.3 血清学分析法
            1.1.5.4 PCR技术
        1.1.6 根肿菌的接种方法
        1.1.7 根肿病抗病育种研究
    1.2 十字花科植物根肿芸薹菌的致病性与遗传多样性研究
        1.2.1 芸薹根肿菌与寄主互作
            1.2.1.1 植物病原菌发生变异的遗传学研究
            1.2.1.2 植物群体抗病性多样性的遗传学研究
            1.2.1.3 病原菌群体致病性多样性的遗传学研究
            1.2.1.4 植物和病原菌互作的遗传学研究
        1.2.2 芸薹根肿病菌致病性分化
        1.2.3 根肿病发病机理研究
    1.3 十字花科植物根肿病综合防治措施
        1.3.1 农业防治
        1.3.2 药剂防治
        1.3.3 生物防治
    1.4 前景与展望
2 优化接种方法的研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 病原菌来源
        2.1.3 接种液的制备
        2.1.4 接种试验优化的研究
            2.1.4.1 试验条件及管理
            2.1.4.2 不同接种方法对发病程度的影响
            2.1.4.3 不同保存形式的菌源对发病程度的影响
            2.1.4.4 应用血球计数板进行孢子计数
            2.1.4.5 室内接种条件的优化处理
            2.1.4.6 调查及评价标准
    2.2 结果与分析
        2.2.1 不同接种方法对发病程度的影响
        2.2.2 不同保存形式的菌源对发病程度的影响
        2.2.3 室内接种条件的优化处理
    2.3 讨论
3 芸薹属作物根肿病抗性品种的筛选
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 病原菌来源
        3.1.3 材料抗/感根肿病鉴定
        3.1.4 数据统计分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 根肿病抗/感鉴定试验
        3.2.2 不同材料对根肿病抗性差异及显著性分析
    3.3 讨论
4 芸薹根肿菌生理小种的检测
    4.1 材料与方法
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌种来源
        4.1.3 ECD鉴别寄主抗/感根肿病鉴定
        4.1.4 数据统计分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 上海青浦区大盈镇根肿菌生理小种鉴定
        4.2.2 湖北长阳火烧坪根肿菌生理小种鉴定
        4.2.3 浙江省台州市温岭根肿菌生理小种的鉴定
        4.2.4 湖北恩施利川根肿菌生理小种的鉴定
        4.2.5 湖北恩施双河镇根肿菌生理小种的鉴定
        4.2.6 浙江省温州市藤桥镇根肿菌生理小种的鉴定
        4.2.7 西藏林芝地区根肿菌生理小种的鉴定
        4.2.8 根肿菌的致病性分化
    4.3 讨论
        4.3.1 ECD16/0/0与为害台湾地区的芸薹根肿菌为同一生理小种
        4.3.2 芸薹种根肿菌存在明显的致病性分化
        4.3.3 芸薹种的芜菁亚种类作物可作为抗根肿病病育种的抗源材料
        4.3.4 各地应因地制宜,选择栽培不同的蔬菜以减轻根肿病的为害
5 芸薹根肿菌的快速鉴别
    5.1 材料与方法
        5.1.1 芸薹根肿菌生理小种来源
        5.1.2 PCR引物及其来源
        5.1.3 病根组织总DNA提取
        5.1.4 PCR反应体系及扩增程序
            5.1.5.1 差异片段的回收
            5.1.5.2 回收产物的载体连接
            5.1.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化
            5.1.5.4 挑菌斑
            5.1.5.5 摇菌
            5.1.5.6 菌液PCR
            5.1.5.7 测序
    5.2 结果与分析
        5.2.1 根肿菌的镜检观察
        5.2.2 测序结果分析
        5.2.3 各生理小种的序列分析
        5.2.4 各生理小种的系统进化树分析
    5.3 讨论
        5.3.1 P.brassicae不同生理小种的rDNA序列具有多态性
        5.3.2 P brassicae rDNA的28S区域保守程度较高
        5.3.3 1RF和2RF两对引物可用于芸薹根肿菌的早期检测
结论
参考文献
附件
作者简历



本文编号：4051864