新烟碱类杀虫剂对人间充质干细胞DNA甲基化谱和基因表达谱的干扰作用

发布时间：2025-06-19 00:08

　　新烟碱类杀虫剂对昆虫烟碱型乙酰胆碱受体具有高度的选择性,对哺乳动物毒性较低。但是研究发现新烟碱类杀虫剂不仅作用于非靶标生物蜜蜂,还会对哺乳动物造成有害影响。动物实验结果发现新烟碱类杀虫剂可增加小鼠和大鼠的患癌风险,但毒性机理仍不清楚。本研究根据表观遗传学变化在环境污染导致的健康危害中起到早期调控作用,研究几种代表性新烟碱类杀虫剂对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的DNA甲基化修饰的干扰作用,通过联合分析研究DNA甲基化调控紊乱与基因异常表达间的关联,并与大鼠表达谱数据对比分析探究新烟碱类杀虫剂的跨物种毒性靶标及种属差异。主要研究内容和结果如下:(1)0.5μM-500μM的啶虫脒(ACE)、烯啶虫胺(NIT)和环氧虫啶(CYC)暴露48小时后对hBMSCs基因组整体甲基化产生抑制作用,并且可能为由TET介导的主动去甲基化过程造成的。噻虫嗪(TMX)使细胞基因组甲基化水平升高,呋虫胺(DIN)对基因组整体甲基化水平的影响尚不明确。(2)ACE暴露导致hBMSCs基因组87个位点及21个区域的甲基化状态发生改变。在差异甲基化基因富集通路网络中,阿尔兹海默症、多巴胺能突触、凋亡和丙型肝炎等处...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.3 DNA微阵列(左)与RNA测序(右)样品准备基本工作流程[85]

相比于DNA微阵列,RNA测序具有更高的分辨率、更精确的定量测量以及更广泛的物种研究的特点[83,84]。RNA测序方法需要在mRNA反转录之前根据polyA尾去除其他RNA,并将其片段化(图1.3,右侧)。cDNA第一、二链合成结束后,连接接头(adapter)构建文库并上....

图1.4研究技术路线

1.6.3技术路线1.6.4研究意义

图2.1甲基化芯片数据分析流程

差异位点注释后进行富集分析,采用R包clusterProfier[94]进行KEGG通路分析。2.1.6数据统计学分析

图2.2几种新烟碱类杀虫剂对h BMSCs LINE-1元件甲基化水平的影响。A.NIT暴露组,B.TMX暴露组,C.ACE暴露组,D.CYC暴露组,E.DIN暴露组(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)

阳性对照结果显示,甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(DAC)显著降低了两种重复性元件的甲基化水平,证明该方法可以有效反映受试物对hBMSCs甲基化水平的影响(图2.2A,图2.3A)。新烟碱类杀虫剂暴露组实验结果显示,除TMX外,其余受试新烟碱类杀虫剂对LINE-1元件的甲基化水平....

本文编号：4050548