水稻抗病相关基因OsBR1顺式调控序列的基因组编辑研究

发布时间:2025-07-19 06:10
  水稻(Oryza Sativa)是我国第一大粮食作物,在我国国民生活及国家粮食生产安全中占有十分重要的地位。影响水稻高产和稳产的的原因有很多,其中病虫害的影响为主要原因之一。其中,水稻稻瘟病是水稻的三大病害之首。然而,稻瘟病菌生理小种变异迅速,随着时间、自然和栽培条件的变化,抗病品种对新的优势生理小种不再具有抗性或者抗性减弱。因此,充分利用基础抗性相关基因,培育优良持久广谱抗病品种,已成为水稻育种工作者的一种共识[1]。我们实验室近年来开展了水稻抗稻瘟病相关基因的研究,创制了大量RNAi材料和过表达材料,并筛选出了一些呈负调控的水稻抗病相关基因。本研究通过对1个稻瘟病抗性相关基因OsBR1启动子区的顺式调控序列进行预测,利用CRISPR/Cas9技术构建了OsBR1启动子的一系列多个靶向序列的基因组编辑载体。并且,利用红色荧光蛋白基因mCherry辅助筛选和PCR测序验证,筛选获得了大量pPLY17、pPLY46和pPLY52的OsBR1基因启动子突变体材料。本研究对pPLY17突变体材料的T0代和T1代进行了较为详细的基...

【文章页数】:103 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1.1植物免疫系统模式图

图1.1植物免疫系统模式图

子(ethyleneresponsefactor,ERF)等。植物类受体合,触发基础免疫反应,从而使植物产生防卫抗性表现为水稻对稻瘟菌的主效基因抗性(ETI)生理小种专化性特点,在应用一段时间过后,快,R基因的单一使用很难培育持久广谱抗病TI抗性,水稻还具有PTI抗....


图1.5CRISPR/Cas系统作用机制[80]

图1.5CRISPR/Cas系统作用机制[80]

Cas)基因位于CRISPR位点附近,Cas基因编码CRISPR转录出的RNA结合成蛋白复合物,共[80]。依靠着单链引导RNA(sgRNA),Cas蛋白点,仅需变化约20个核苷酸就能靶向不同DNPR位点第一个重复片段之间存在着CRISPR前责CR....


图2.1pYLCRISPR/Cas9Pubi-H载体图谱

图2.1pYLCRISPR/Cas9Pubi-H载体图谱

20图2.1pYLCRISPR/Cas9Pubi-H载体图谱Figure2.1SchematicdiagramofpYLCRISPR/Cas9Pubi-Hvector.2.3实验菌株肠杆菌DB3.1:用于载体pYLCRISPR/Cas9Pubi-H的改造....


图2.2pPLY13载体图谱

图2.2pPLY13载体图谱

第2章水稻OsBR1基因启动子CRISPR/Cas9载体的构建为了建立转基因水稻的高通量遗传分析筛选系统,本研究对LCRISPR/Cas9Pubi-H进行了改造,即在pYLCRISPR/Cas9Pubi-H的....



本文编号:4058122

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