植物内生真菌Nigrospora oryzae和Irpex lacteus共培养次生代谢产物和活性的研究

发布时间：2025-04-11 05:47

　　铁皮石斛是一种中药材和兰花。所有兰花都需要真菌来为种子发芽和早期幼苗发育提供无机和有机营养。因此我们推断铁皮石斛内生菌的代谢能力应该强于其他内生菌。本论文主要是对铁皮石斛植物内生真菌黑孢菌(Nugrisoira oryzae)和白耙齿菌(Irpex lacteus)共培养次生代谢产物和活性进行研究。论文内容分为四章:第一章综述了黑孢属(Nigrospora)和白耙齿属(Irpex)的次生代谢产物和生物活性研究进展;及部分青霉属(Penicillium)化合物的抗菌活性进展。第二章主要是目标菌株筛选与实验设计,从云南文山采集的铁皮石斛种子中分离出19株植物内生真菌。并对19株植物内生真菌进行TLC筛选,从中筛选出2株植物内生真菌,分别是菌株1(TPZ-30)、菌株23(TPZ-10-1)。再对这2株内生真菌进行混合培养,通过TLC显色,菌株1(TPZ-30)和菌株23(TPZ-10-1)共培养次生代谢产物化学多样性增加。通过对两株菌株ITS序列测定,TPZ-30为白耙齿菌(Irpex lacteus),TPZ-10-1 为黑孢菌(Nigrosporaoryzae)。第三章主要是对铁皮石斛内...

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中文摘要
Abstract
第一章 黑孢属(Nigrospora)和白耙齿属(Irpex)的次生代谢产物和生物活性研究进展;及部分青霉属(Penicillium)化合物的抗菌活性研究进展
    1 引言
    2 黑孢属(Nigrospora)次生代谢产物的研究
        2.1 酯类
            2.1.1 马来内酯
            2.1.2 脑苷脂
            2.1.3 酸酯
        2.2 生物碱
            2.2.1 异鞘氨醇类生物碱
            2.2.2 吲哚生物碱
        2.3 蒽醌类
        2.4 萜类
        2.5 酮类
            2.5.1 吡喃酮
            2.5.2 呋喃酮
            2.5.3 吡咯烷酮
            2.5.4 环戊烯酮衍生物
        2.6 灰黄霉素类
        2.7 其他类
    3 白耙齿(Irpex)次生代谢产物的研究
        3.1 萜类
            3.1.1 Tremulane倍半萜
            3.1.2 5,6-seco-tremulane类似物
            3.1.3 三萜类化合物
        3.2 其他类
            3.2.1 真菌白耙齿(Irpex)对除草剂Dimethenamid-P的转化
    4 部分青霉属(Penicillium)化合物的抗菌活性
第二章 目标菌株筛选与实验设计
    1 目标菌株的筛选
        1.1 材料
            1.1.1 菌株来源
            1.1.2 培养基
            1.1.3 实验药品
            1.1.4 实验仪器
            1.1.5 菌株分离前准备
            1.1.6 铁皮石斛植物内生菌的分离步骤
    2 铁皮石斛内生菌株的分离与筛选
        2.1 目标菌株的混菌筛选
        2.2 混菌与单菌的对比复筛
第三章 铁皮石斛内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzae)和白耙齿菌(Irpex lacteus)混合液体培养次生代谢产物及生物活性研究
    1 前言
    2 实验部分
        2.1 实验材料
            2.1.1 研究菌种
            2.1.2 液体发酵培养基
        2.2 实验试剂及仪器
        2.3 TPZ-10-1与TPZ-30混菌的液体扩大发酵及提取分离
            2.3.1 液体扩大发酵
            2.3.2 提取分离
        2.4 单体化合物的结构鉴定
            2.4.1 新化合物的结构鉴定
            2.4.2 化合物的物理常数和波谱数据
            2.4.3 黑孢菌(Nigrospora oryzae)和白耙齿茵(Irpex lacteus)混合液体培养化学相互作用
            2.4.4 抗菌活性
            2.4.5 抗肿瘤细胞毒活性筛选测定结果
            2.4.6 一氧化氮(NO)生成抑制剂筛选测定结果
            2.4.7 脂肪酶活性抑制测定结果
            2.4.8 酪氨酸酶活性抑制测定结果
            2.4.9 AChE抑制活性筛选测定结果
        2.5 本章小结
第四章 铁皮石斛内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzae)和白耙齿(Irpex lacteus)混合固体培养次生代谢产物及生物活性研究
    1. 内生真菌混合培养的改进
        1.1 内生真菌不同类型培养基的液体混合培养
        1.2 内生真菌不同时间的液体混合培养
        1.3 铁皮石斛内生菌TPZ-10-1(Nigrospora oryzae)和TPZ-30(Irpex lacteus)混合固体培养
    2. 实验部分
        2.1 培养基
        2.2 实验仪器及试剂
        2.3 TPZ-10-1与TPZ-30混菌的固体扩大发酵及提取分离
            2.3.1 种子液的培养
            2.3.2 扩大发酵
            2.3.3 提取分离
        2.4 化合物的物理常数和波谱数据
        2.5 抗菌活性
        2.6 本章小结
参考文献
附录
部分缩略语
攻读硕士学位期间完成的成果
致谢



本文编号：4039600