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大鲵源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定、敏感药物筛选及耐药性分析

发布时间:2025-04-26 23:39
  近年来,大鲵疾病频发,为了确定重庆某大鲵养殖场患病大鲵的病原菌,并进行菌种鉴定及胞外酶活性研究,从具有典型症状的病鲵肝脏分离出一株菌株TNL12,根据形态学特征、生理生化特性以及16S rDNA分析对菌株进行种类鉴定,通过人工感染试验确定病原菌株的致病性,利用平板法检测胞外酶活性。结果显示,所获菌株为革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,其生理生化特性与弗氏柠檬酸杆菌一致。16S rDNA分析表明,TNL12与弗氏柠檬酸杆菌的同源性为99%,在系统发育树与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支。该病原菌可引起健康青蛙、大鲵出现感染症状,且感染症状与自然发病症状相似。胞外酶活性检测发现该菌可产卵磷脂酶、淀粉酶,但不产脂酶、蛋白酶、明胶酶、脲酶等胞外酶。这些研究结果表明,从患病大鲵中分离出的病原菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),且对大鲵有较强的致病性。在大鲵病害防治的过程中,由于抗生素的不合理使用,使许多病原菌对抗生素产生了一定的抗性,为研究有效防治大鲵疾病的方法,采用纸片扩散法研究所分离的病原菌对20种抗生素的敏感性。实验结果表明,本次分离的病原菌TNL12为弗氏柠檬酸杆菌,对林可霉素类...

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图5-1?45种中草药对弗氏梓檬酸杆菌的抑制效果比例图??

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图5-1?45种中草药对弗氏梓檬酸杆菌的抑制效果比例图??f?Citrobacter?Freundii?on?the?Sensitivity?of?45?Kinds?of?Chinese?Medicinal?He表5-2?45种中草药提取液对大鲍源弗氏梓檬酸杆菌的抑菌效果??


图6-2?MsrD全长序列电泳检测图??--

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图6-1?MsrD基因电泳检测图??Figure?6-1?Electrophoresis?Map?of?MsrD?Gene?Detection??

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图6-4耐P-内酜胺类抗生素的耐药基因检测??Fiure?6-4?Resistant?Gene?Detection?on-lactams?Antibiotic??

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将实验中检测到的所有目的基因送至华大基因科技有限公司(北京)进行测序,所??得序列与NCBI中Genebank报道的基因序列进行BLAST比对,测得所得序列与大肠杆??菌中耐P-内酰胺类抗生素抗性基因Tem同源性均达100%,比对结果如图6-5,证明本??次分离于大鲍的弗氏梓檬酸....



本文编号:4041542

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