镜鲤不同选育世代对疱疹病毒（CyHV-3）抗病力评估
发布时间：2025-07-19 03:36
锦鲤疱疹病毒病（KHVD）由锦鲤疱疹病毒3型（CyHV-3）引起,随着该病在全球鲤养殖产区的连续爆发,给鲤的规模化养殖带来巨大经济损失,因此研究鲤对CyHV-3防御机制对防治该病具有重要意义。对镜鲤抗锦鲤疱疹病毒（CyHV-3）新品种的选育工作,目前已进行到F3代。本研究利用实时荧光定量PCR技术及免疫指标检测试剂盒技术研究三个选育世代的CyHV-3病毒载量、免疫相关基因（TRAF6、MyD88a、IL-1β、TLR7a、I-IFN）的表达、磷酸酶活性（AKP、ACP）、抗氧化能力（GSH、SOD、T-AOC）、特异性免疫相关指标（IgM）及非特异免疫相关指标（LZM、C3、C4）的变化规律,对镜鲤抗病选育世代进行抗病力评估。研究结果如下:CyHV-3病毒载量比较:病毒感染时,三个选育世代的脾中CyHV-3病毒载量均显著高于肾（P<0.05）,说明CyHV-3可能主要侵染鲤的脾组织。三个选育世代间,CyHV-3病毒载量在脾和肾中呈下降趋势,其中F3脾、肾中病毒载量显著低于F1、F2（P<0.05）,推测选育世代间抗病力具有逐代增强的...
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
1.1 鱼类固有免疫应答
1.1.1 防御屏障的作用
1.1.2 固有免疫应答的识别机制
1.1.3 固有免疫的效应细胞
1.1.4 固有有免疫的效应分子
1.2 鱼类适应性免疫应答
1.2.1 淋巴细胞抗原识别、提呈及激活
1.2.2 适应性免疫应答的效应机制
1.3 本研究的目的及意义
第二章 鲤CyHV-3病毒载量比较及选育世代抗病力评估
2.1 材料和方法
2.1.1 实验设计
2.1.2 实验鱼及样品采集
2.1.3 主要试剂及仪器
2.1.4 基因组DNA提取
2.1.5 CyHV-3病毒载量的相对定量
2.1.6 实时荧光定量PCR
2.1.7 数据统计与分析
2.2 结果与分析
2.2.1 基因组DNA提取
2.2.2 选育世代间CyHV-3病毒载量情况比较
2.2.3 脾、肾中CyHV-3病毒载量情况比较
2.3 讨论
第三章 鲤免疫基因的差异表达及选育世代抗病力评估
3.1 材料和方法
3.1.1 实验设计
3.1.2 实验用鱼及样品采集
3.1.3 实验试剂及仪器
3.1.4 总RNA提取
3.1.5 未感染组感染CyHV-3检测
3.1.6 实时荧光定量PCR
3.1.7 数据统计与分析
3.2 结果与分析
3.2.1 基因组DNA、总RNA提取、cDNA合成
3.2.2 夏花组CyHV-3 检测结果
3.2.3 未感染组F1、F2、F3中免疫基因的表达
3.2.4 感染组F1、F2、F3中免疫基因的表达
3.2.5 感染组脾、肾组织免疫基因表达
3.3 讨论
3.3.1 免疫基因表达分析
3.3.2 抗病力评估
第四章 组织中免疫相关指标的变化及选育世代抗病力评估
4.1 材料和方法
4.1.1 样本采集与处理
4.1.2 实验试剂
4.1.3 实验仪器
4.1.4 免疫指标检测
4.1.5 数据统计与分析
4.2 结果与分析
4.2.1 磷酸酶活性比较
4.2.2 抗氧化能力比较
4.3 讨论
4.3.1 鱼类磷酸酶酶活分析
4.3.2 鱼类抗氧化能力分析
4.3.3 抗病力评估
第五章 血清中免疫相关指标的变化及选育世代抗病力评估
5.1 材料和方法
5.1.1 实验设计
5.1.2 样本采集与处理
5.1.3 实验试剂
5.1.4 实验仪器
5.1.5 数据统计与分析
5.2 结果与分析
5.2.1 溶菌酶(LZM)活性比较
5.2.2 补体C3、补体C4比较
5.2.3 免疫球蛋白M(IgM)比较
5.3 讨论
5.3.1 血清中非特异性免疫指标及特异性免疫指标比较分析
5.3.2 抗病力评估
第六章 养殖对比实验及选育世代抗病力评估
6.1 材料和方法
6.1.1 实验场地选择及养殖模式
6.1.2 网箱规格及排布方式
6.1.3 放养密度及养殖管理
6.1.4 捕捞及统计
6.2 结果与分析
6.3 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读硕士论文期间发表的学术论文
本文编号：4057918
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
1.1 鱼类固有免疫应答
1.1.1 防御屏障的作用
1.1.2 固有免疫应答的识别机制
1.1.3 固有免疫的效应细胞
1.1.4 固有有免疫的效应分子
1.2 鱼类适应性免疫应答
1.2.1 淋巴细胞抗原识别、提呈及激活
1.2.2 适应性免疫应答的效应机制
1.3 本研究的目的及意义
第二章 鲤CyHV-3病毒载量比较及选育世代抗病力评估
2.1 材料和方法
2.1.1 实验设计
2.1.2 实验鱼及样品采集
2.1.3 主要试剂及仪器
2.1.4 基因组DNA提取
2.1.5 CyHV-3病毒载量的相对定量
2.1.6 实时荧光定量PCR
2.1.7 数据统计与分析
2.2 结果与分析
2.2.1 基因组DNA提取
2.2.2 选育世代间CyHV-3病毒载量情况比较
2.2.3 脾、肾中CyHV-3病毒载量情况比较
2.3 讨论
第三章 鲤免疫基因的差异表达及选育世代抗病力评估
3.1 材料和方法
3.1.1 实验设计
3.1.2 实验用鱼及样品采集
3.1.3 实验试剂及仪器
3.1.4 总RNA提取
3.1.5 未感染组感染CyHV-3检测
3.1.6 实时荧光定量PCR
3.1.7 数据统计与分析
3.2 结果与分析
3.2.1 基因组DNA、总RNA提取、cDNA合成
3.2.2 夏花组CyHV-3 检测结果
3.2.3 未感染组F1、F2、F3中免疫基因的表达
3.2.4 感染组F1、F2、F3中免疫基因的表达
3.2.5 感染组脾、肾组织免疫基因表达
3.3 讨论
3.3.1 免疫基因表达分析
3.3.2 抗病力评估
第四章 组织中免疫相关指标的变化及选育世代抗病力评估
4.1 材料和方法
4.1.1 样本采集与处理
4.1.2 实验试剂
4.1.3 实验仪器
4.1.4 免疫指标检测
4.1.5 数据统计与分析
4.2 结果与分析
4.2.1 磷酸酶活性比较
4.2.2 抗氧化能力比较
4.3 讨论
4.3.1 鱼类磷酸酶酶活分析
4.3.2 鱼类抗氧化能力分析
4.3.3 抗病力评估
第五章 血清中免疫相关指标的变化及选育世代抗病力评估
5.1 材料和方法
5.1.1 实验设计
5.1.2 样本采集与处理
5.1.3 实验试剂
5.1.4 实验仪器
5.1.5 数据统计与分析
5.2 结果与分析
5.2.1 溶菌酶(LZM)活性比较
5.2.2 补体C3、补体C4比较
5.2.3 免疫球蛋白M(IgM)比较
5.3 讨论
5.3.1 血清中非特异性免疫指标及特异性免疫指标比较分析
5.3.2 抗病力评估
第六章 养殖对比实验及选育世代抗病力评估
6.1 材料和方法
6.1.1 实验场地选择及养殖模式
6.1.2 网箱规格及排布方式
6.1.3 放养密度及养殖管理
6.1.4 捕捞及统计
6.2 结果与分析
6.3 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读硕士论文期间发表的学术论文
本文编号：4057918
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