桃树根癌病病原分离及拮抗菌筛选研究
发布时间：2025-06-09 23:37
桃树根癌病是一种危害严重的细菌性病害,防治十分困难。生物防治是目前国内外植物病害防治的重要手段和发展方向,植物病害的生物防治要基于生防菌的分离,如何从自然界数量庞大的微生物群体中筛选到有效的生防菌株是生物防治的重要基础,也是评价生物防治效果的前提。本试验首先对桃树根癌病细菌进行了分离和鉴定,接着又从土壤中分离出一系列细菌、真菌及放线菌菌株,通过与病原细菌进行相应的平板对峙试验,筛选出对根癌病菌有明显拮抗作用的菌株,最后将筛选获得的拮抗菌株在指示植株上进行了初步的病害防治试验。主要研究结果如下:从桃树根瘤中分离出20株具有土壤杆菌菌落特征的分离物,通过培养性状、染色镜检观察和16S r DNA分子鉴定初步确定了其中的A-4菌株为根癌土壤杆菌,生理生化鉴定及BIOLOG鉴定又进一步确定A-4菌株为根癌土壤杆菌生物型II型。通过分子生物学、向日葵幼苗和桃树幼苗接种等试验,确定A-4菌株含有Ti质粒,具有较强致病性,可以导致向日葵和桃树产生根癌。从感病植株根际土样和健康植株根际土样中共分离得到细菌21株、真菌9株、放线菌33株,采用琼脂扩散法测定了它们对桃树根癌病菌A-4菌株的抑制作用,又将这些...
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
abstract
前言
第一章 文献综述
1 根癌病的发生分布及其危害
2 根癌土壤杆菌的分类
3 根癌土壤杆菌的生物学性状
4 根癌土壤杆菌的致病性及其致病过程
5 根癌土壤杆菌致病机理的研究进展
6 根癌病防治的研究进展
6.1 根癌病防治的一般方法
6.2 根癌病化学防治研究进展
6.3 根癌病生物防治研究进展
6.4 根癌病基因工程防治研究进展
7.立题背景及研究意义
7.1 立题背景
7.2 研究的目的与意义
第二章 桃树根癌土壤杆菌的分离、纯化与鉴定
1 材料与方法
1.1 供试植物材料
1.2 供试菌株
1.3 根癌土壤杆菌的分离与纯化
1.4 根癌土壤杆菌的鉴定
1.4.1 菌株形态特征的观察
1.4.2 16S r DNA鉴定
1.4.3 Biolog鉴定
1.5 根癌土壤杆菌致病性的测定
1.5.1 向日葵幼苗针刺接种试验
1.5.2 桃树两年生幼苗接种试验
1.5.3 病原菌的PCR检测
1.6 根癌土壤杆菌生物型和质粒类型的测定
1.6.1 根癌土壤杆菌生物型的测定
1.6.2 根癌土壤杆菌质粒类型的测定
2 结果与分析
2.1 桃树根癌病病原细菌的分离与形态观察
2.2 桃根癌病病原细菌的 16S r DNA分子生物学鉴定
2.3 桃根癌病病原菌A-4 菌株的BIOLOG鉴定
2.4 桃根癌病病原菌A-4 菌株的致病性测定
2.4.1 向日葵幼苗针刺接种试验
2.4.2 桃树两年生幼苗接种试验
2.4.3 病原菌的PCR检测
2.5 根癌土壤杆菌生物型和质粒类型的测定
2.5.1 根癌土壤杆菌生物型的测定
2.5.2 根癌土壤杆菌质粒类型的测定
3 结论与讨论
第三章 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落的比较及根际土壤有益微生物的分离
1 材料与方法
1.1 土样的采集
1.2 方法
1.2.1 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落的比较
1.2.2 土壤细菌、真菌及放线菌的分离
1.2.3 菌种的保存
1.2.4 土壤中不同种细菌的分类
2 结果与分析
2.1 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落组成结构的比较
2.2 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落多样性的比较
2.3 桃树根际土壤细菌的分离
2.4 桃树根际土壤真菌的分离
2.5 桃树根际土壤放线菌的分离
3 结论与讨论
第四章 桃根癌土壤杆菌拮抗菌株的筛选
1 材料与方法
1.1 供试菌株
1.2 土壤细菌拮抗根癌土壤杆菌平板抑菌能力的测定
1.3 土壤细菌发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
1.4 土壤真菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
1.5 土壤放线菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
1.6 土壤放线菌发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2 结果与分析
2.1 土壤细菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.2 土壤细菌的发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.3 土壤真菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.4 土壤放线菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.5 土壤放线菌的发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.6 土壤细菌的 16S r DNA分子生物学鉴定
3 结论与讨论
第五章 拮抗菌株在温室指示植物上的防治效果试验
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌株
1.1.2 供试指示植物
1.2 接种用具
1.3 菌株的活化
1.4 番茄幼苗针刺接种试验
1.5 拮抗微生物对温室指示苗根癌病的抗病促生作用
2 结果与分析
2.1 拮抗微生物对温室指示植物根癌病的抗病作用
2.2 拮抗微生物对温室指示植物的促生作用
3 结论与讨论
第六章 全文总结与展望
1 全文总结
2 存在的问题与展望
参考文献
附录一
附录二
附录三
本文编号：4049982
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
abstract
前言
第一章 文献综述
1 根癌病的发生分布及其危害
2 根癌土壤杆菌的分类
3 根癌土壤杆菌的生物学性状
4 根癌土壤杆菌的致病性及其致病过程
5 根癌土壤杆菌致病机理的研究进展
6 根癌病防治的研究进展
6.1 根癌病防治的一般方法
6.2 根癌病化学防治研究进展
6.3 根癌病生物防治研究进展
6.4 根癌病基因工程防治研究进展
7.立题背景及研究意义
7.1 立题背景
7.2 研究的目的与意义
第二章 桃树根癌土壤杆菌的分离、纯化与鉴定
1 材料与方法
1.1 供试植物材料
1.2 供试菌株
1.3 根癌土壤杆菌的分离与纯化
1.4 根癌土壤杆菌的鉴定
1.4.1 菌株形态特征的观察
1.4.2 16S r DNA鉴定
1.4.3 Biolog鉴定
1.5 根癌土壤杆菌致病性的测定
1.5.1 向日葵幼苗针刺接种试验
1.5.2 桃树两年生幼苗接种试验
1.5.3 病原菌的PCR检测
1.6 根癌土壤杆菌生物型和质粒类型的测定
1.6.1 根癌土壤杆菌生物型的测定
1.6.2 根癌土壤杆菌质粒类型的测定
2 结果与分析
2.1 桃树根癌病病原细菌的分离与形态观察
2.2 桃根癌病病原细菌的 16S r DNA分子生物学鉴定
2.3 桃根癌病病原菌A-4 菌株的BIOLOG鉴定
2.4 桃根癌病病原菌A-4 菌株的致病性测定
2.4.1 向日葵幼苗针刺接种试验
2.4.2 桃树两年生幼苗接种试验
2.4.3 病原菌的PCR检测
2.5 根癌土壤杆菌生物型和质粒类型的测定
2.5.1 根癌土壤杆菌生物型的测定
2.5.2 根癌土壤杆菌质粒类型的测定
3 结论与讨论
第三章 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落的比较及根际土壤有益微生物的分离
1 材料与方法
1.1 土样的采集
1.2 方法
1.2.1 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落的比较
1.2.2 土壤细菌、真菌及放线菌的分离
1.2.3 菌种的保存
1.2.4 土壤中不同种细菌的分类
2 结果与分析
2.1 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落组成结构的比较
2.2 桃健康植株和感病植株根际土壤微生物群落多样性的比较
2.3 桃树根际土壤细菌的分离
2.4 桃树根际土壤真菌的分离
2.5 桃树根际土壤放线菌的分离
3 结论与讨论
第四章 桃根癌土壤杆菌拮抗菌株的筛选
1 材料与方法
1.1 供试菌株
1.2 土壤细菌拮抗根癌土壤杆菌平板抑菌能力的测定
1.3 土壤细菌发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
1.4 土壤真菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
1.5 土壤放线菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
1.6 土壤放线菌发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2 结果与分析
2.1 土壤细菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.2 土壤细菌的发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.3 土壤真菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.4 土壤放线菌拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.5 土壤放线菌的发酵滤液拮抗根癌土壤杆菌能力的测定
2.6 土壤细菌的 16S r DNA分子生物学鉴定
3 结论与讨论
第五章 拮抗菌株在温室指示植物上的防治效果试验
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌株
1.1.2 供试指示植物
1.2 接种用具
1.3 菌株的活化
1.4 番茄幼苗针刺接种试验
1.5 拮抗微生物对温室指示苗根癌病的抗病促生作用
2 结果与分析
2.1 拮抗微生物对温室指示植物根癌病的抗病作用
2.2 拮抗微生物对温室指示植物的促生作用
3 结论与讨论
第六章 全文总结与展望
1 全文总结
2 存在的问题与展望
参考文献
附录一
附录二
附录三
本文编号：4049982
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