长期继代的柑橘愈伤组织中转座子激活研究

发布时间：2025-06-19 04:57

　　愈伤组织以其繁殖速度快、易于保存等优点被认为是果树种质资源离体保存的一种方式,然而愈伤组织在组织培养中会存在许多遗传变异。转座子的转座激活也被证实是导致遗传变异的分子机制之一,近几年的研究发现转座子还参与到了基因组进化、基因表达调控、逆境响应等过程。研究果树转座子激活有助于为降低种质保存的遗传变异提供分子基础,有助于为创新种质资源提供新方法,有助于为理解果树芽变提供新思路。本课题检测了长期保存后的柑橘愈伤的体细胞胚胎发生能力,利用Transposon Display(TD)、Southern杂交、定量PCR等方法检测了长期保存的柑橘愈伤中转座子的转座活性,同时探索了诱导转座子转座激活的因素,主要实验结果如下:1.长期继代保存的伏令夏橙愈伤组织依然保留着体细胞胚胎发生能力,本研究所用的9个长期继代的该品种愈伤系材料中6个具有胚胎发生能力,经流失细胞仪鉴定,胚状体能保持原来的倍性。然而,6个愈伤系材料的胚状体中仅有1个愈伤系能够生芽。因此长期继代保存会对柑橘愈伤的体细胞胚胎发生能力产生影响。2.TD实验结果表明:在长期保存柑橘愈伤中,Csgypsy1、Csgypsy2、Cscopia3、Cs...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词表
1 前言
    1.1 课题的提出
    1.2 前人研究进展
        1.2.1 植物体细胞无性系变异概述
        1.2.2 植物中转座子研究进展
        1.2.3 柑橘转座子研究进展
    1.3 本研究的目的和意义
2 材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 柑橘愈伤DNA提取
        2.2.2 RNA的提取
        2.2.3 转座子显示技术
        2.2.4 Southern blot
        2.2.5 反转录cDNA第一链的合成与转座子定量PCR
        2.2.6 倍性分析
3 结果与分析
    3.1 柑橘愈伤材料的体细胞胚发生及植株再生
    3.2 柑橘愈伤材料转座子拷贝数统计
        3.2.1 候选转座子的挑选
        3.2.2 伏令夏橙愈伤转座子拷贝数统计
        3.2.3 转座子southern杂交
    3.3 转座子转录活性检测
4 讨论
    4.1 柑橘愈伤中转座子激活现象
    4.2 转座子活性的影响因素
    4.3 柑橘芽变与转座子的关系
参考文献
附录
致谢



本文编号：4050892