粒毛盘菌多酚生物活性及其作用机理研究

发布时间：2025-06-06 05:23

　　本研究选用粒毛盘菌YM156进行深层发酵,经过提取、初步纯化获得胞内多酚LSP156,采用液相串联质谱对其组成成分进行分析,并对LSP156的保肝和降血糖活性及其作用机理进行研究。液相串联质谱分析结果表明,LSP156中含有多种多酚类物质,包括大豆苷、胸苷、异鼠李素、樱花素等。采用N-亚硝基二乙胺(NDEA)建立小鼠急性肝损伤模型,对LSP156的保肝活性进行初步研究。结果表明,与NDEA模型组相比,LSP156显著性降低谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平,提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的含量。并且,通过肝脏组织病理学观察,LSP156的预处理减少了NDEA导致的肝脏组织病变。这些结果表明LSP156具有肝保护作用。为了深入研究LSP156的保肝活性及其作用机理,采用N-亚硝基二乙胺(NDEA)诱导小鼠建立慢性肝损伤模型。结果表明,相比于模型组,LSP156能有效地提高SOD、CAT、谷胱甘肽(GSH)的水平,降低丙二醛(MDA)、AST、A...

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 多酚类化合物
    1.2 多酚类化合物的提取、纯化及组分分析
        1.2.1 多酚类化合物的分离提取
        1.2.2 多酚类化合物的纯化
        1.2.3 多酚类化合物的鉴定
    1.3 多酚类化合物的生物学功能
        1.3.1 抗氧化作用
        1.3.2 降血糖作用
        1.3.3 保肝活性
        1.3.4 免疫调节作用
        1.3.5 调节肠道菌群
        1.3.6 神经保护作用
        1.3.7 其他生物学功能
    1.4 粒毛盘菌的研究现状及应用
    1.5 本课题的研究内容及意义
第二章 粒毛盘菌YM156多酚对二乙基亚硝胺诱导急性肝损伤的保护作用
    2.1 引言
    2.2 材料与仪器
        2.2.1 实验菌种
        2.2.2 实验试剂
        2.2.3 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 粒毛盘菌YM156胞内多酚的提取和初步纯化
        2.3.2 LSP156总酚含量的测定
        2.3.3 LC-MS/MS分析
        2.3.4 实验动物及分组
        2.3.5 生化指标测定
        2.3.6 肝组织病理学分析
        2.3.7 统计学方法
    2.4 结果与分析
        2.4.1 LC-MS/MS分析
        2.4.2 LSP156对小鼠肝功能指标的影响
        2.4.3 LSP156对小鼠体内抗氧化酶的影响
        2.4.4 LSP156 对小鼠体内TC和 TG水平的影响
        2.4.5 LSP156对小鼠炎性因子的影响
        2.4.6 LSP156对小鼠肝组织病理学的影响
    2.5 讨论
    2.6 本章小结
第三章 LSP156对NDEA诱导肝损伤的保护作用及其作用机理
    3.1 引言
    3.2 材料和仪器
        3.2.1 相关试剂
        3.2.2 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 实验动物及分组
        3.3.2 生理生化指标的测定
        3.3.3 肝组织病理学分析
        3.3.4 免疫印迹分析
        3.3.5 16Sr RNA基因扩增及Mi Seq测序
        3.3.6 统计分析
    3.4 结果
        3.4.1 LSP156对内脏指数和氧化应激标志物的影响
        3.4.2 LSP156对肝损伤标志物及组织病理学检查的影响
        3.4.3 LSP156对小鼠炎症因子的影响
        3.4.4 LSP156对小鼠中肠道菌群的影响
        3.4.5 LSP156对肠道菌群中宏基因组代谢途径的影响
        3.4.6 生理指标与肠道微生物的相关性分析
        3.4.7 LSP156对STAT3/COX-2 信号通路的影响
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
第四章 LSP156对STZ诱导的糖尿病小鼠的降血糖活性及其作用机制
    4.1 引言
    4.2 材料和仪器
        4.2.1 实验试剂
        4.2.2 实验仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 体外降血糖活性
        4.3.2 实验动物及分组
        4.3.3 口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素耐量试验(ITT)的测定
        4.3.4 器官指数和体内HOMA稳态模型评估
        4.3.5 血清和组织匀浆中生物标志物的测定
        4.3.6 组织病理学分析
        4.3.7 实时聚合酶链反应
        4.3.8 免疫印迹分析
        4.3.9 统计分析
    4.4 结果
        4.4.1 LSP156对体重、空腹血糖、器官系数和胰岛指标的影响
        4.4.2 LSP156对胰岛素敏感性和胰腺组织学的影响
        4.4.3 LSP156对高血糖引起的肝损伤的影响
        4.4.4 LSP156对小鼠体内的氧化还原反应的影响
        4.4.5 LSP156对高血糖小鼠脂质代谢的影响
        4.4.6 LSP156对IRS/Akt/GSK-3β信号通路的影响
    4.5 讨论
    4.6 本章小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
    5.3 创新点
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文与申报的专利



本文编号：4049856