过表达IGF-1的小鼠骨髓间充质干细胞分泌物对缺氧心肌细胞的抗凋亡作用

发布时间：2025-06-21 02:23

　　 目的探讨IGF-1过表达的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺氧时小鼠心肌细胞凋亡的影响。方法以小鼠BMSCs为研究对象,利用慢病毒转染技术,构建过表达IGF-1的BMSCs(IGF-1-BMSCs)及其对照细胞(NC-BMSCs)。与正常培养相比,1%氧浓度构建低氧诱导的细胞凋亡模型。流式细胞术观察低氧诱导对BMSCs及心肌细胞凋亡率的影响;流式细胞术观察加入IGF-1-BMSCs上清液时低氧诱导对心肌细胞凋亡率的影响; Western blotting检测低氧模型细胞内Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bax)及抗凋亡蛋白(Bcl-2)、Caspase家族蛋白(caspase-3、8、9)及细胞色素C(Cyto C)的表达。结果与NC-BMSCs细胞对比,低氧诱导时IGF-1-BMSCs细胞的凋亡率明显下降[(36.85±1.02)%vs (15.66±4.36)%,P <0.05],抗凋亡蛋白Bcl-2明显增加,而促凋亡蛋白Bax、caspase-3、caspase-8及细胞色素C的释放明显减少(P <0.05)。与正常培养相比,低氧处理显著诱导心肌细胞凋亡[(10.89±...

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【部分图文】：

图1 IGF-1过表达慢病毒感染的原代骨髓间充质干细胞

结果表明，慢病毒感染BMSCs后IGF-1病毒感染率在96%±3%以上(见图1)。IGF-1-BMSCs组中IGF-1表达量与对照组(NC-BMSCs)相比，明显增加(P<0.05，见图1)。表明构建过表达IGF-1的BMSCs细胞成功。2.3低氧诱导对BMSCs的凋亡率的影响

图2 Western blot检测低氧诱导条件下培养48 h凋亡相关蛋白的表达水平

低氧诱导时，小鼠BMSCs细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著下降，而促凋亡蛋白Bax、细胞色素C(CytoC)、caspase-3及caspase-8的表达水平则明显上调;过表达IGF-1则可以显著提升Bcl-2水平，而抑制Bax、细胞色素C(CytoC)、caspas....

图3 Western blot检测IGF-1-BMSCs培养液对低氧诱导时心肌细胞蛋白表达的影响

为了进一步确定IGF-1-BMSCs分泌物是否对心肌细胞凋亡通路产生影响。加入或者不加入BMSCs上清液后的低氧诱导的心肌细胞裂解后进行了Westernblot检测，结果表明:低氧处理的心肌细胞，与正常培养相比，Bcl-2的表达水平显著下降，而Bax、CytoC、caspas....

本文编号：4051766