新发布尼亚病毒反向遗传学系统的构建以及病毒基因组重排和非编码区的研究

发布时间：2025-08-12 18:24

　　班阳病毒属于布尼亚病毒目(Bunyavirales),白纤病毒科(Phenuiviridae),班阳病毒属(Banyangvirus)。截至目前,国际病毒分类委员会(ICTV)所公布的班阳病毒有三种,分别为发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV),Heartland virus(HRTV),和Guertu virus(GTV),三者皆为新发布尼亚病毒。与其他布尼亚病毒类似,班阳病毒主要有三个负链RNA片段构成,即L片段,M片段和S片段。病毒基因组片段皆由开放阅读框(ORF)和非编码区(UTR)构成。Heartland virus是2009-2010年间分离并确认于美国的新发布尼亚病毒,目前主要流行于美国中西部和南部各州。Heartland virus的传播途径主要是通过蜱虫叮咬,所引发的临床症状与发热伴血小板减少综合征病毒极为类似,包括发热,疲乏,食欲降低,头痛,恶心,腹泻,肌肉或关节疼痛以及白细胞和血小板数目的减少等症状。目前,针对HRTV尚无有效的疫苗或治疗性药物,并且HRTV反向遗传学系统尚没有成功构建。本研究基于T7启动子成功构建了HRTV L,M和S片段的微复制子系统(mini...

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.2布尼亚病毒反向遗传学系统的构成示意图。

对于负链RNA病毒来说,反向遗传学系统的建立不仅能够帮助我们对相关病毒从分子生物学层面有更进一步的了解,而且基于这些理论的认识,反向遗传学系统也极大的促进了设计性疫苗和抗病毒药物的发展。对于班阳病毒以及基因结构相对比较类似的其它布尼亚病毒来说,已报道并且建立起的反向遗传学系统主要....

图1.3反向遗传学系统模拟班阳病毒在宿主细胞内复制过程的图示。p T7-HRTV-L/M/S(-)和pT7-HRTV-L/M/S(+)的转录产物分别为v RNA和cRNA。以病毒的vRNA为模板可以合成cRNA和m RNA,而m RNA可以表达病毒生命周期所需要的结构与非结构蛋白。而子代vRNA可以以cRNA为模板大量合成,之后子代vRNA与病毒的结构蛋白相互作用形成RNP复合物。RNP复合物与病毒膜蛋白相互作用被包装进子代病毒。

班阳病毒进入宿主细胞后,其复制过程主要发生于宿主细胞的细胞质。班阳病毒在宿主细胞内的复制过程为:病毒侵入宿主细胞后,在细胞质中进行转录、翻译、复制和子代病毒的包装。首先以病毒的vRNA为模板合成信使RNA,进而翻译表达病毒所需的结构蛋白如L蛋白、膜蛋白Gn和Gc、核蛋白NP以及非....

图1.4两种不同的三节段布尼亚病毒感染相同宿主细胞时的基因重排模型。

布尼亚病毒的三个基因组片段皆有5’和3’非编码区(5’UTR,3’UTR),中间为编码病毒结构蛋白和非结构蛋白的开放阅读框(ORF)。尽管对于不同病毒的基因组片段其UTR在序列和长度上不尽相同,但是对于布尼亚病毒来说,其非编码区不仅具有种属特异性,而且高度保守。对于分节段的且遗传....

图1.5 Minigenome和i VLP系统模拟班阳病毒的RNP包装和病毒包装过程。图中1,2,3为核蛋白NP衣壳化病毒基因组使其形成锅饼状结构以及之后招募L蛋白形成RNP的过程;图中4为RNP与膜蛋白Gn/Gc相互作用的过程;图中5为RNPs被包装进病毒样颗粒或者成熟病毒粒子的过程。

微复制子系统(minigenomesystems)和感染性病毒样颗粒系统(iVLPsystems)在1.1.2中已做了详细的介绍。布尼亚病毒在宿主细胞内的复制过程主要可分为(Amrounetal.,2017;Hornaketal.,2016;WichgersSchr....

本文编号：4058948