台湾桤木DNA提取方法的优化及抗氧化剂对DNA质量的影响
发布时间:2025-07-09 04:47
分析比较了抗坏血酸和β-巯基乙醇两种抗氧化剂在CTAB法和SDS法中对台湾桤木DNA提取质量的影响,结果表明:使用CTAB法比较适合台湾桤木叶片DNA的提取。在抗氧化剂的选择上,使用两种抗氧化剂均能发挥防止DNA褐化的作用,但因β-巯基乙醇使用便捷、效果稳定,更适合作为台湾桤木DNA提取的抗氧化剂。
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本文编号:4057180
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图1 不同浓度-巯基乙醇和抗坏血酸在两种DNA提取方法提取DNA电泳图
添加抗坏血酸的样品在研磨过程中样品始终保持新鲜青绿色状态,水浴45min后仍保持鲜绿色,使用氯仿抽提后的上清液也呈略带黄绿的澄清液体,最后使用异丙醇沉淀时得到白色且易溶于TE的絮状DNA沉淀。β-巯基乙醇是在65℃水浴前在离心管中加入后混匀,因此在研磨过程中不可避免的样品已经被氧....
图2 台湾桤木6个种源样品DNA琼脂糖凝胶电泳图
一种高效的DNA提取方法在分子生物学中至关重要[9],通常植物组织富含多糖、多酚类物质,会降低提取到的DNA质量从而影响后续PCR扩增的结果[10]。CTAB可以有效去除多糖,SDS虽可有效去除蛋白质但对多糖多酚不能有效去除[11],本研究发现使用两种方法结果差异不大。SDS法提....
图3 引物QR82在6个台湾桤木种源样品中SSR-PCR扩增结果
图2台湾桤木6个种源样品DNA琼脂糖凝胶电泳图植物叶片中的多糖、多酚等次生物质会在DNA沉淀时附着在DNA上形成难溶于TE的胶状沉淀或是发生褐变[13,14]。使用抗氧化剂可以避免植物样品发生褐变以去除多酚类次生物质[15]。本研究结果表明β-巯基乙醇和抗坏血酸都可以在抗氧化上....
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