贵州关岭余甘子内生真菌多样性及其抗菌抗氧化活性

发布时间：2025-06-19 00:13

　　 目的:了解贵州关岭余甘子内生真菌的多样性,探究余甘子果汁抗氧化及抑菌功能的相关性。方法:取贵州省关岭县10月份野生健康成熟新鲜的余甘子果实,采用研磨法获得余甘子果汁;采用组织分离法对果实进行内生真菌分离,按照菌丝尖端切割法接种至马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基纯化3次并保存;取本校真菌室提供的标准菌株,采用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒提取分离获得的真菌菌株DNA、并通过聚合酶链式反应（PCR）扩增其内转录间隔区（ITS）基因序列后测序,采用分子系统学方法对分离获得的真菌菌株进行鉴定、归类及多样性评估,采用邻接法（N-J）基于ITS序列构建系统发育树;摇床培养提取内生菌发酵液,采用纸片扩散法对发酵液和余甘子果汁进行抑菌活性测试,并绘制维生素C（Vc）标准曲线测定菌株的总抗氧化能力。结果:余甘子果实中分离出内生真菌43株,其中青霉属19株、横梗霉属9株、间座壳属11株、叶点霉属1株、葡萄座腔菌属3株,青霉属为优势属,其中Penicillium chrysogenum分离出15株,数量最多,为优势菌种;ITS序列比对结果显示,分离株43株、标准株5株,构建N-J系统发育树;43株内...

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【部分图文】：

图1 43株余甘子内生真菌菌属的构成

健康成熟新鲜余甘子果实中分离出内生真菌43株，其中青霉属(PenicilliumLink)19株、横梗霉属(LichtheimiaVuill.)9株、间座壳属(DiaportheNitschke)11株、叶点霉属(PhyllostictaPers.)1株、葡萄座腔菌属(N....

图2 43株余甘子内生真菌菌种的构成

图143株余甘子内生真菌菌属的构成2.2分离菌株系统发育分析

图3 43株菌株基于ITS序列的构建系统发育树

对分离出的内生真菌基于ITS序列进行比对，每个菌属选择1个标准菌株，共有分离株43株，标准株5株，构建N-J系统发育树。见图3。2.3抑菌活性测试

图4 Vc标准曲线

由实验的标准品对照得出，Vc标准曲线回归方程为y^=0.8095x-0.0828,R2=0.9937(图4);经样品测试，43株菌的发酵液总抗氧化能力明显高于空白培养基，相对于Vc的抗氧化能力范围介于104.76～156.64mg/L，其中YGZ02菌株能力最低，YGZ....

本文编号：4050554