SWI/SNF染色质重塑复合物在人胚胎干细胞中的组成及其作用伴侣的研究

发布时间：2025-06-20 03:22

　　SWI/SNF是一种在进化上保守的ATP依赖的多亚基染色质重塑复合物,其核心亚单位BRG1或BRM具有ATP酶活性,它们利用水解ATP释放的能量来改变染色体的结构,从而改变转录调控因子对核小体DNA的可接近性,进而实现对基因表达的调控。研究发现SWI/SNF在细胞的多个生理过程中具有重要作用,如转录调节、细胞周期等。目前在胚胎干细胞中有关SWI/SNF复合物的相关报道,多数是在鼠的胚胎干细胞(Mouse embryonic stem cell,MES)中的研究,尚无在人胚胎干细胞(Human embryonic stem cell,HES)中的报道。我们利用蛋白质免疫印迹、快速液相层析、蛋白质免疫共沉淀和质谱分析等实验技术对SWI/SNF染色质重塑复合物在HES中的组成及其分子伴侣进行了探究。快速液相层析实验结果表明,BRG1、BAF155和BAF170存在同一复合物中,蛋白质免疫共沉淀实验发现,BRG1可以共沉淀BAF155、BAF170,同时,BAF155、BAF170也可以共沉淀BRG1,说明在HES中BRG1,BAF155、BAF170相互作用。另外,我们发现SWI/SNF组分在...

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摘要
ABSTRACT
第一章 综述
    第一节 染色质重塑复合物
    第二节 胚胎干细胞与SWI/SNF复合物
    第三节 SWI/SNF复合物功能机制研究
第二章 实验材料和方法
    第一节 实验材料
        1. 实验试剂
        2. 实验仪器
        3. 质粒
        4. 细胞株
        5. 细胞培养
        6. 抗体
    第二节 实验方法
        1. 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)
        2. 分子克隆(molecular cloning)
        3. 稳定转染细胞系的构建
        4. 快速蛋白液相色谱(Fastprotein liquid chromatography,FPLC)
        5. 免疫共沉淀(coimmunoprecipitation,COIP)技术
        6. 蛋白质免疫印迹(Western Blotting,WB)技术
        7. 银染(silver staining)技术
        8. 质谱分析(mass spectrometry analysis)技术
第三章 实验结果与分析
    第一节 SWI/SNF复合物在HES中的组成分析
    第二节 质谱分析SWI/SNF在HES中的组成及其作用伴侣
第四章 总结与讨论
附录
参考文献
致谢



本文编号：4051351