NRSE/RE-1序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系

发布时间：2025-05-01 08:46

　　 目的探索神经限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系。方法应用序贯诱导法定向诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,基因芯片筛选出的11种含NRSE/RE-1序列的神经相关基因,实时定量PCR测定其在分化过程中的表达。结果诱导分化后的胚胎干细胞表达多种成熟神经元标志,11种含NRSE/RE-1序列基因随诱导分化的进程表达量升高。结论鼠胚胎干细胞可通过序贯诱导分化为神经细胞,NRSE/RE-1序列可能是胚胎干细胞向神经元诱导分化的主要调控位点。

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【部分图文】：

图4，分化第十天细胞高倍镜下形态

一个细长突起，类似多级神经元(图3)。高倍镜下可见一些突起末端与其他细胞突起接触，末端膨大，类似突触样结构;还有的细胞突起末端膨大，类似生长端样结构(图4)。图l，未分化ESCs光镜图左图，生长于饲养层上的ESCs，呈集落样生长，细胞排列紧密，集落边界清楚(40x)右图，碱性磷酸....

图2，分化第四天细胞低倍镜下形态

出现一定的形态变化，细胞呈多角形从集落向外伸展，第4天起开始出现明显形态变化，部分细胞仍聚集成集落，其周围的细胞逐渐伸出突起，向四周伸展，整个培养中细胞形态的改变并不同时，并不是所有的细胞形态都是一致的(图2);随后，分化细胞突起逐渐变长、变细，与邻近分化细胞交织成网状。中间集落....

图3，分化第十天细胞低倍镜下形态

细胞团增大后随每次换液逐渐脱落。贴壁分化细胞大多为双极细胞，胞体圆亮，两极各有一细长突起。也有小部分分化细胞胞体成多边形，有多个短突起，仅有一个细长突起，类似多级神经元(图3)。高倍镜下可见一些突起末端与其他细胞突起接触，末端膨大，类似突触样结构;还有的细胞突起末端膨大，类似生长....

图6，n种基因Real一tirnePCR的检测结果

在分化第4天表达最高，随分化过程表达量逐渐下降，到D10为D4的1/4;成熟神经元标志基因NSE的表达随诱导分化升高，即第10天为最高;其他n种待测基因的表达水平D10与DO相比都有不同程度的增长(见图6)。进一步分析，通过计算D4、D10时间点与DO的相对增长比率(见图7)，可....

本文编号：4041991