抗菌融合肽MAE基因mae的亚克

发布时间：2025-06-26 22:53

　　MAE是本实验室设计、化学合成的具有理想抗菌活性的融合抗菌肽，来源 于蛙皮素的N端和蜂毒素的N端，中间加上铰链区AGP（Ala-Gly-Pro），已根 据其氨基酸残基序列设计了mae基因（全长81bp），并已克隆到pTYB2，并 在大肠杆菌ER2566中表达。但该系统表达的目的蛋白MAE分子量太小，量 也少，难以检测到。 本文把mae基因从pTYB2-mae亚克隆到pMYB5，即设计上下游引物， 双酶切PCR产物和载体pMYB5进行定向克隆，经过鉴定、测序，证实已克 隆成功。大肠杆菌ER2566（pMYB5-MAE）诱导表达的产物过几丁质亲和 层析柱，纯化得到融合表达的MBP-MAE，其分子量较大，即使有少量表达 也比较容易检测。同时，在MAE的N端有麦芽糖结合蛋白，在C端有内蛋 白子，使之表达稳定。MBP-MAE通过CNBr切割，可将MAE切下来，根据 MAE的阳离子多肽的特性，通过...

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 前言
    一、 抗菌肽的概念和分类
        一） 抗菌肽、抗生素和抗真菌小肽的区别
        二） 抗菌肽的分类
    二、 抗菌肽的活性
        一） 抗菌肽抗菌活性及其作用机制
        二） 抗菌肽抑癌活性及其作用机制
    三、 抗菌肽蛋白质工程
    四、 组织培养药物测试
    五、 论文背景与构思及技术路线
第二部分 MA-E基因的亚克隆、表达和纯化
    一、 MA-E基因的亚克隆
        一） 实验材料
        二） 实验方法
        三） 实验结果
    二、 MA-E基因的表达和纯化
        一） 实验材料
        二） 实验方法
        三） 实验结果
第三部分 MA-E生物活性检测
    一、 抗菌活性检测
        一） 实验材料
        二） 实验方法
        三） 实验结果
    二、 抑癌活性检测
        一） 实验材料
        二） 实验方法
        三） 实验结果
        小结
第四部分 讨论
参考文献
附录一： 各种试剂的配制方法
附录二： 测序图谱
致谢



本文编号：4053398