新型抗炎因子IL-37真核表达载体pIRES2-EGFP/IL-37的构建及鉴定

发布时间：2025-07-09 03:41

　　 目的构建新型抗炎因子IL-37的真核表达载体p IRES2-EGFP/IL-37(p IEIL37)并进行鉴定。方法 Trizol法提取THP-1细胞RNA,RT-PCR扩增IL-37基因,将目的基因片段定向克隆到真核表达载体p IRES2-EGFP;将重组质粒转化大肠杆菌DH5,并进行PCR、双酶切和DNA测序鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳显示1条约710 bp大小的条带;双酶切结果显示约675 bp大小的条带;DNA测序表明IL-37基因正确插入真核表达载体p IRES2-EGFP。结论成功构建IL-37真核表达载体p IRES2-EGFP/IL-37。

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【部分图文】：

图3pIEIL37PCR鉴定250100

分特异片段的扩增。PCR反应的条件如下：94℃预变性5min、PCR鉴定也显示扩增出了IL-37的部分性的片段约94℃变性30s、55℃退火30s，72℃延伸30s，共30220bp(见图3)。DNA测序结果显示IL-37基因正确插个循环，最后72℃延伸7min。PCR产物经琼脂....

图4pIEIL37测序部分结果

indstotheIL-18receptorbutdoesnot的作用[J].中国细胞生物学学报,2013,35(3):381-386.induceIFN-production[J].Cytokine,2002,18(2):61-70.[16]GaoW,KumarS,LotzeM....

本文编号：4057093